Фракционирование экстракта выделяемого из восковой моли.
Гидрофобная хроматография (ГХ). Колонку (1,2 х 3 см) с сорбентом (бутил-тойоперл 650) уравновешивали 0,05 М Na-фосфатным буфером, рН 7.3, содержащим 0,9 М Na2S04. Экстракт наносили на колонку со скоростью 15 мл/ч. После нанесения и промывания уравновешивающим буфером белки
66
элюировали в ступенчатом градиенте концентрации 0,3 М и 0,1 М Na2SCgt;4. Фракция с максимальной антибактериальной активностью элюировалась в буфере с 0,1 М Na2S04. Далее очистку этой фракции проводили на тандеме колонок с №(П)-ИДК- Си(П)-ИДК агарозой.
Металл-хелат аффинная хроматография (МХАХ). На тандем колонок с №(И)-ИДК-агарозой (1x4 см) и с Си(И)-ИДК агарозой (1,4 х 3 см) уравновешенных 0,05 М Na-фосфатным буфером, рН 7.3, с 0,2 М NaCl наносили фракцию с максимальной антибактериальной активностью после гидрофобной хроматографии со скоростью 20 мл/ч. После элюции балластных белков 0,05 М Na-фосфатным буфером, рН 7.3, с 0,2 М NaCl, колонки разъединяли. Элюцию белков с колонки, заряженной ионами меди, проводили последовательным добавлением 0,05 М и 0,25 М имидазола. Фракция обладающая максимальной липолитической и антибактериальной активностями элюировалась в буфере с добавлением 0,05 М имидазола.
Электрофорез в денатурирующих условиях в 12%-ном
полиакриламидном геле проводили по методу Леммли [212] на приборе
Mini Protein II («Bio-Rad», США). Использовали набор маркеров с
молекулярной массой в диапазоне 14,4 - 97 кДа («Sigma», США).
Статистический анализ проводили с использованием стандартных математических методов в компьютерной программе «Microsoft-Excel».
67
Еще по теме Фракционирование экстракта выделяемого из восковой моли. :
- 3.3.2. Фракционирование экстракта восковой моли
- 3.3. Изучение свойств экстракта выделенного из восковой моли Galleria mellonella
- 3.1. Получение хитина и низкомолекулярного хитозана из кутикулы восковой моли GalleriamellonellaL
- ВЫПИСКА (ЭКСТРАКТ
- Алмонд выделяет «доиндустриальную», а С.
- 7.52. Знаки препинания отделяющие и выделяющие
- ОСТАНИНА ЕКАТЕРИНА СЕРГЕЕВНА. ТЕХНОЛОГИЯ ПЕРЕРАБОТКИ ВОСКОВОЙ МОЛИ, ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ СВОЙСТВ ХИТОЗАНА И ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ С ЛИПОЛИТИЧЕСКИМИ ФЕРМЕНТАМИ. Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук. Щёлково-2007, 2007
- Сколько земли выделяли римляне одному колонисту
- 25. Основные концепции, выделяющие место человека в мире
- 3.3. Умение выделять учебную задачу
- 24. Выделяют такие виды проекции:
- 145. Какие признаки дарения выделяет арбитражная практика?
- В творчестве Ницше выделяется три периода:
- Выделяют следующие формы вненаучного знания:
- 26. Принято выделять общие и специальные способности
- Выделяют следующие основные парапсихологические феномены:
- С позиции определенности предмета исполнения выделяются альтернативные и факультативные обязательства.
- 253. Какие признаки договора безвозмездного пользования выделяет практика?
- § 5. Разряды модальных слов и частиц, выделяемые по их современному значению и употреблению
- § 5. Разряды модальных слов и частиц, выделяемые по их современному значению и употреблению