3.3. Изучение свойств экстракта выделенного из восковой моли Galleria mellonella

Анненковым Г.А.

С целью выяснения действующего начала в экстракте, обладающем противотуберкулезной активностью мы провели ряд экспериментов. В качестве тест-культуры нами был взят атипичный штамм М. smegmatis, являющийся модельным объектом в начальных испытаниях противотуберкулезных препаратов.

Было показано, что экстракт, выделяемый из личинок восковой моли обладает антибактериальной активностью в отношении клеток М. smegmatis. Предполагая, что за противотуберкулезную активность ответственны липазы присутствующие в экстракте, параллельно с антибактериальной активностью, нами определялась и специфическая - липолитическая активность экстракта

3.3.1. Изучение зависимости гибели клеток М. smegmatisот времени взаимодействия с экстрактом восковой моли

Для изучения зависимости гибели клеток микобактерий от времени взаимодействия с экстрактом, пробы отбирали через 15, 30, 60, 90 и 120 минут (рис.9). Было показано, что достаточно 60 мин контакта экстракта в концентрации 1 мг/мл по белку, с культурой М. smegmatis, чтобы до 34% клеток потеряли жизнеспособность. 90 мин было найдено оптимальным временем экспозиции клеток с экстрактом. Чувствительность клеток при

98

времени инкубации с экстрактом в течение 90 мин. составляла 60%. При

увеличении времени экспозиции до 120 мин гибель клеток увеличивалась

незначительно.

100 и

|80" I60-

,40-

*8 20-

0 i11..i1

0       15      30      60      90      120 Время экспозиции, мин

Рис. 9. Гибель бактерий М. smegmatis(% от общего количества клеток) при взаимодействии с экстрактом при 37 °С и рН 6,5 в зависимости от времени

экспозиции (мин)

Необходимо отметить, что с увеличением антибактериальной активности, росли значения липолитической активности (данные не приводятся). После кипячения препараты обладавшие антибактериальной активностью, теряли активность. Следовательно, ответственной за антибактериальное действие можно считать белковую составляющую экстракта. Согласно литературным данным, на сегодняшний день известен ряд препаратов обладающих широким спектром антибактериальной активности выделяемых из насекомых. Известно, что большинство из них имеют белковую природу [232-234]. С учетом этого была проведена очистка экстракта полученного из восковой моли.