ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ СООБЩЕСТВ В ВОДОЕМАХ, ЗАГРЯЗНЯЕМЫХ ОТХОДАМИ ЦЕЛЛЮЛОЗНО-БУМАЖНЫХ ПРОИЗВОДСТВ Т.М. Тимакова
Учреждение Российской академии наук Институт водных проблем Севера Карельского научного центра РАН, Петрозаводск, Россия е-mail: ttm49@mail.ru
Водные бактерии, обладая высокой регенеративной способностью, быстро реагируют на изменяющиеся условия среды.
Они выполняют основную роль в самоочищении водоемов и являются чуткими индикаторами при поступлении в них загрязнений. При антропогенном вмешательстве естественные бактериальные сообщества, адаптированные к присутствию в воде веществ природного происхождения, претерпевают изменения, которые зависят от природы поступающих загрязнений. Эти изменения в бактериоценозах проявляются, прежде всего, в качественной и количественной перестройке составляющих их видов и выражаются в ускоренном развитии групп бактерий, использующих загрязняющие вещества в качестве метаболитического и конструктивного субстрата.В регионе с развитым лесопромышленным комплексом основными потребителями и загрязнителями водоемов являются сточные воды целлюлозно - бумажных комбинатов (ЦБК). Они относятся к экологически опасным, характеризуются слабым эвтрофирующим эффектом, но, высоким содержанием серы и органических веществ, на минерализацию которых из воды расходуется большое количество кислорода. Поэтому, непреложным требованием для ЦБК является проведение мероприятий по их удалению из сточных вод с целью снижения негативного влияния на водоем.
Трансформация бактериоценозов в водоемах, принимающих сточные воды ЦБК в целом, имеет схожий характер. В данной работе прослежена основная направленность изменений природных бактериальных сообществ за 50-летний период под влиянием сточных вод ЦБК, расположенного на побережье Кондопожской губы Онежского озера.
За исследуемый период на комбинате неоднократно менялись объемы сбрасываемых сточных вод и производственные технологии, что приводило к изменению их состава, особенно содержания в них органического и биогенных веществ.
Анализ количественных показателей бактериоценозов и развития наиболее показательных функциональных групп бактерий за последние 50 лет свидетельствует о последовательности их трансформации под влиянием сточных вод ЦБК. Можно выделить 3-4 основных периода, в течение которых бактериальные сообщества существенным образом претерпевали изменения.Исходное состояние экосистемы залива - олиготрофное, с признаками ультраолиготрофии. Бактериальные сообщества характеризовались низкой численностью бактериальных сообществ - 0,2-0,3 млн.· мл-1, небольшим содержанием сапрофитных бактерий - до 200 КОЕ · мл-1. Жизнедеятельность бактериопланктона базировалась преимущественно на органическом веществе автохтонного происхождения.
Заметные изменения в бактериоценозах вершинной части залива стали проявляться в 60-годах. Они выразились в увеличении общей обсемененности воды и, особенно, - сапрофитной группы бактерий. Так, при росте общей численности в 4-5 раз, количество сапрофитных бактерий увеличилось более чем на порядок и достигло максимальных значений - 8 тыс. КОЕ · мл-1. Доминирующее положение в ценозах имели аэробные бактерии.
В 70-х годах последовательный рост мощностей комбината сопровождался увеличением сбрасываемых в водоем неочищенных сточных вод, что привело к перегрузке вершинной части губы органическими соединениями, и к более глубокой перестройке бактериальных ценозов. Вблизи комбината количество бактерий возросло до 2,0 и более млн. кл. · мл-1 (рис.1). Сапрофитные бактерии на отдельных участках достигали 30 тыс. (в среднем 9 тыс.) КОЕ · мл-1, что составляло около 4% от общей численности. Санитарный показатель «К» был около 100. Значительное развитие имели грибы и дрожжи, часто встречались зооглейные скопления бактерий типа Zooglea ramigera, бактериальные нити типа Sphaerotilus natans (Филимонова, 1975). Бактерии-нитрификаторы отсутствовали. Нитрификационный процесс прослеживался лишь на некотором удалении от комбината.
Заметное развитие имели аэробные углеводородокисляющие бактерии и колиформные бактерии. Coli- ind, на значительной акватории достигал 2380 (табл.1). В вершинной части губы стали проявляться признаки антропогенного эвтрофирования, в развитии, которого особая роль принадлежала гетеротрофному звену, так как аллохтонное органическое вещество, включающееся в биотический круговорот, превалировало над автохтонным. На отдельных участках интенсивное развитие имели процессы аммонификации, сульфатредукции, метаногенеза, следствием которых было накопление в воде восстановленных соединений - H2S, NH4.
Рис. 1. Многолетняя изменчивость общей численности бактерии в Кондопожской губе. Примечание: 1964 - 1989 гг. - данные Филимоновой Н.А., 1990; 1991 - 2007 - наши данные.
Особо заметные изменения в бактериоценозах произошли в начале 80-х годов после введения станции биологической очистки (СБО). Со сточными водами в залив стало значительно меньше поступать целлюлозно-древесного волокна, биохимически лабильного органического вещества, сернистых соединений. Вместе с тем, функционирование на начальных этапах СБО сопровождалось резким увеличением выноса в водоем фосфора - до 109 т в год - (в 5-6 раз) и азота (в 15-30 раз), что привело к насыщению воды фосфором до 17-70 мкг/л, и интенсивному развитию фитопланктона то есть обогащению воды автохтонным органическим веществом. Все эти изменения в экосистеме стали основополагающими, которые привели к заметному снижению в бактериопланктоне доли сапрофитных бактерий. Их численность по сравнению с семидесятыми годами снизилась с
7450±1320 до 2200±980 КОЕ-л"1, что имело достоверное подтверждение - t = 2,89 при p > 0,05. Величины общей численности, наоборот, проявили тенденцию к увеличению, хотя она имела недостоверный характер. Заметно уменьшилось присутствие в сообществах колиформных бактерий (см.
рис.1, табл.1). Но, несмотря на все усилия по снижению поступления в водоем целлюлозно-бумажного волокна в первые годы работы СБО, в воде наблюдалось высокое содержание целлюлозоразрушающих бактерий. Их количество достигало 1,0 тыс.кл. - мл-1, а в углубленных участках около комбината, возрастала до 0,1 - 1,0 млн. кл - мл-1. Доля этих бактерий в структуре бактериоценозов составляла 0,01 -7,4%. Способность бактериоценозов к разрушению клетчатки около выпуска волокносодержащих стоков была очень высокой (табл. 2). Ее значения более чем на порядок превышали показатели в центральном районе Онежского озера, и в эвтрофных и олигодистрофных водоемах Карелии (Тимакова, Романенко, 1984).Таблица 1
Содержание колиформных бактерий в Кондопожской губе и пелагических районах озера, (КОЕ· л-1)
Район озера | 1964-1965 гг (Нестерова, 1971) | 70-е г.г. (Филимонова, 1975) | 80-е г.г. (Филимонова, 1990) | 2006-2007 г.г. (наши данные) | |
Кондопожская губа | В районе города | 2380 | 2380 | 2380 | 3545-3580 |
Срединная часть | - | 2380 | < 9-230 | 100-2490 | |
Внешняя часть губы | 23 | 250 | < 9-23 | 125-312 | |
Большое Онего | 23-230 | - | - | 25-196 | |
Центральное Онего | 176-339 | - | - | 50-125 |
Таблица 2
Целлюлозолитическая способность бактериоценозов Кондопожской губы, мкг С · л-1сут-1
Район | Min - max | Среднее |
Центральная часть | 0,04 -0,11 | 0,08±0,03 |
Около комбината | 0,15 - 11,9 | 3,13±1,87 |
Функционирование в течение 10 лет СБО (в конце 80-х - начале 90-х годов) привело к ускоренному развитию в водоеме фитопланктона и процесса антропогенного эвтрофирования.
Формирование бактериоценозов в этот период происходило в сложных условиях постепенного роста тро- фии и пресса на экосистему органического вещества, выносимого в составе сточных вод. Общая численность бактерий для акватории в среднем составляла 1,4± 0,6 млн. кл. - мл-1. При отсутствии четкого разделения на зоны, вся акватория губы, по уровню развития микроорганизмов, была условно разделена на два района - вершинный и центральный, который достоверно отличался от вершинного - t=3,63 для общей численности и t=3,3 для гетеротрофных бактерий при p>0,05. Выразительным показателем в этот период, характеризующим состояние бактериоценозов, была темновая ассимиляция СО2 (рис.2). Ее летние величины варьировали на акватории губы в пределах от 0,8 до 10,0 мкг С - л-1- сут -1 (в вершинной части -10,03, в центральной - 1,87). За счет темновой ассимиляции СО2 в столбе воды под м2 ежесуточно фиксировалось 154,1 и 122,6 мг углерода соответственно, что составляло 37,9% и 45,6% от световой за счет фотосинтеза (406,8 и 268,8 мкг С - л-1- сут -1). В водоемах олиго- и даже мезотрофного типа это соотношение не превышает 10-20% (Романенко, 1985). То есть, несмотря на 10-летний период функционирования СБО и значительное снижение выноса в водоем легкоокисляемого ОВ, гетеротрофное звено продолжало играть весомую роль в развитии антропогенного эвтрофирования.Так как с момента пуска СБО в залив со сточными водами стало выноситься большое количество азотистых веществ, то это стимулировало развитие в заливе нитрифицирующих бактерий, обеспечивающих процесс литотрофной нитрификации. Их количество в воде достигало от η·10 до п-1000 кл. в 1мл., что на порядок выше по сравнению с открытыми районами озера, где их численность не превышала 10 - 100 кл. - мл-1. Интенсивность литотрофной нитрификации в вершинном участке в толще воды достигала средних значений- 9,45 ± 2,9 мг N- л-1 - сут-1, а в центральной части - 1, 68 ± 0,6 (рис.3).
В среднем для губы ее величина составляла 4,23 мг N· л-1 · сут-1, что почти в 4 раза превышало значения для открытых районов озера.
Рис.2. Распределение темновой ассимиляции СО2 в поверхностном слое воды в летний период на акватории Кондопожской губы и пелагических районах озера (среднее за 1989-2006 г.г.)
Рис. 3. Распределение среднелетних величин литотрофной нитрификации на акватории Кондопожской губы и в открытых районах озера.
Начало 90-х годов характеризовалось заметным спадом производства, произошло почти 30%- ное снижение антропогенной нагрузки на водоем по сравнению с 80-ми годами. Это почти сразу отразилось на количественных показателях бактериопланктона. Особенно заметным снижением их величин к 1993 г. выделялся вершинный участок губы, где жизнедеятельность бактерий базируется преимущественно на ОВ, поступающем со сточными водами. Здесь было отмечено достоверное снижение(1=3,5 при р >0, 05) общей численности - до 1,4-2,1 млн.кл.-мл-1. Особенно наглядно отреагировал бактериопланктон изменением биосинтетической активности. К середине 90-х гг. выявлено достоверное (t=3,6 при p>0,05) снижение величин темновой ассимиляции углекислоты до 3,06,0 мкг С-л-1-сут.-1 (рис 4).
Для Кондопожской губы, характерно значительное превышение деструкции ОВ над первичной продукцией (Теканова, Тимакова, 2006). Суточная бактериальная продукция в вершинной и центральной части губы составляет 2,5 и 2,1 г Ом-2, что также сильно превышает первичную продукцию, - в 6-8 раз. Даже если учесть, что расчет бактериальной продукции из темновой ассимиляции СО2 дает завышенные результаты раза в 3, бактериальная продукция, тем не менее, будет превышать первичную в 2-3 раза. Это свидетельствует о высоком вкладе бактериального звена в биотический круговорот и сильном влиянии на развитие бактериопланктона ОВ вносимого со сточными водами, несмотря на многолетнее функционирование СБО.
Рис. 4. Изменение летних величин темновой фиксации CO2 за период 1989 - 2006 гг в поверхностном слое воды Кондопожской губы
Поступление в Кондопожскую губу со сточными водами органических и минеральных веществ обусловило развитие функциональных групп бактерий, отражающих наличие в воде специфических загрязнителей. Помимо сапрофитных бактерий, которые относятся к общепризнанной индикаторной группе в водной микробиологии, демонстрирующей наличие биохимически нестойкого органического вещества, постоянной составляющей бактериальных сообществ являются микроорганизмы, участвующие в минерализации сложных трудноокисляемых органических соединений. Так количество олигокарбофильных бактерий в 1,5-7 раз превышает численность сапрофитных и достигает 0,02 - 0,5% от общей численности. Высокая плотность этих микроорганизмов до 25 тыс. КОЕ · мл-1 обнаруживается в районе сброса сточных вод, где отмечается повышенное содержание лигносульфонатов. Меньшую долю в ценозах (0,02 - 0,15%), по сравнению с олигокарбофильными, составляют бактерии, относящиеся к группе актиномицет, которые участвуют в разложении широкого спектра органических веществ, особенно имеющих сложное молекулярное строение. Их численность варьирует в широких пределах, а средние величины на акватории составляют 850 и 2720 КОЕ · мл-1. Повсеместно присутствуют в воде фенолрезистентные бактерии - показатели степени экологического риска загрязнения поверхностных вод ароматическими соединениями (Дзюбан и др, 2001; Каретникова, 2002). В чистых водах они, как правило, имеют низкую численность - единицы колоний в 1мл (Крыленкова, Ширенко, 2002), а в Кондопожской губе она достигает максимальных величин 2213, а в среднем около 500 КОЕ · мл-1 . Углеводородокисляющие бактерии, также как и фенолрезистентные, являются прямыми индикаторами техногенного загрязнения. Их численность на акватории изменяется от 20 до 3400 КОЕ· мл-1 , а средняя величина составляет 670± 208 КОЕ · мл-1. Особой группой бактерий, демонстрирующей загрязнение вод являются колиформные бактерии (ЛПКП), относящиеся к показателям эпидемиологического благополучия водоема. На акватории губы эти бактерии присутствуют повсеместно, однако максимальной обсемененностью воды характеризуется район выпуска сточных вод, где, по сравнению с предыдущими периодами исследований, проявляется тенденция к увеличению их содержания (см. табл.1).
Таким образом, трансформация бактериальных сообществ в губе за период с 60-х по 2000-е годы происходит в сложных условиях загрязнения ее вод отходами ЦБК и развития антропогенного эвтрофирования. Этот процесс характеризуется несколькими этапами, связанными с развитием производства и проведением природоохранных мероприятий на комбинате. На поступление сточных вод ЦБП бактериальные сообщества реагируют не только закономерным повышением общей численности и количества бактерий, растущих на обогащенных органическим веществом средах, но и возрастанием в сообществах доли специфических групп бактерий.
При отсутствии очистки сточных вод ЦБК, содержащих в своем составе большое количество биохимически лабильного органического вещества, интенсивное развитие имели сапрофитные бактерии, изымающие из воды кислород. Заметное присутствие в бактериоценозах имели денитрифицирующие, тионовые, сульфатредуцирующие, целлюлозоразрушающие бактерии. Значительного развития достигали угле- водородокисляющие и целлюлозоразрушающие бактерии, однако, прекращение молевого сплава и изъятие из сточных вод волокнистых веществ в середине 80-х годов сопровождалось заметным снижением количественных показателей этих бактерий. А резкое снижение выноса со сточными водами легкоокисляемого органического вещества привело к существенному снижению в бактериальных сообществах доли сапрофитных бактерий. Увеличение объемов сбрасываемых в залив веществ с малым эффектом биологической очистки (лигносульфонатов) привело к повышению содержания олигокарбофильных бактерий и актино- мицет по сравнению с чистыми водами озера. Кроме того, весьма показательной явилась активизация нитрифицирующих бактерий при поступлении в губу стоков, прошедших биологическую очистку. Бактерии, растущие на средах с фенолами и лигносульфоновыми кислотами, в определенной степени, можно считать индикаторными при загрязнении водоемов отходами целлюлозно-бумажного производства. Постоянными представителями бактериоценозов являются бактерии группы кишечной палочки, количество которых в последние годы заметно возрастает по сравнению с прошлыми десятилетиями, что может свидетельствовать о неудовлетворительном обеззараживании сточных вод, поступающих в губу после СБО.
Быстрая реакция бактериопланктона на снижение антропогенной нагрузки в середине 90-х годов позволяет отнести его к чувствительным звеньям биоты на загрязнение водоемов отходами целлюлознобумажной промышленности, в том числе и на развитие процессов антропогенного эвтрофирования.
Литература
Дзюбан А.Н., Косолапов Д. Б., Кузнецова И. А. 2001. Микробиологические процессы в Горьковском
водохранилище. // Водные ресурсы. Т. 28, № 1. С. 47-57.
Каретникова Е. А. 2002. Оценка экологического риска фенольного загрязнения водных экосистем : Ав- тореф. дис. ... канд. биол. наук. Хабаровск. 22 с.
Крыленкова Н. Л., Ширенко Л. А. 2003. Фенолы Ладожского озера: микробиологический аспект. // Охрана и рациональное использование водных ресурсов Ладожского озера и других больших озер. Тр. 1V Меж- дун. Симпоз. по Ладожскому озеру. Великий Новгород. С. 121-125.
Романенко В. И. 1985. Микробиологические процессы продукции и деструкции органического вещества во внутренних водоемах. / Ред. А.В. Монаков. Л.: «Наука». 295с.
Теканова Е. В., Тимакова Т. М. 2006. Первичная продукция и деструкция органического вещества в онежском озере. / Ред. А.Ф. Алимов, В.В. Бульон. М.: Товарищество научных изданий КМК. С. 60-70.
Тимакова Т. М., Романенко В. И. 1984. Целлюлозные бактерии и потенциальная способность разложения целлюлозы в озерах Карелии. // Микробиология. Т. 53, вып. 1, С. 142-148.
Филимонова Н. А. 1975. Распределение микроорганизмов в воде и донных отложениях. // Кондопожская губа Онежского озера в связи с ее загрязнением промстоками ЦБК. Ч. 11. Отдел водн. пробл. Кар. Фил. АН СССР. С. 213-229.