Получениенизкомолекулярногокрабовогохитозана.

Для получения низкомолекулярного хитозана 1 г исходного высокомолекулярного хитозана выдерживали в течение 6 ч при комнатной температуре в растворе, содержащем 40 мл 1 М уксусной кислоты, 10 мл 1%-ного раствора №N3 и 106 мл воды. Добавлением 1 М NaOH значение рН раствора доводили до 5,2, нагревали до 45°С и добавляли ферментный комплекс. Гидролиз проводили в течение 1 ч. Реакцию останавливали кипячением раствора в течение 10 мин. Полученный гидролизат хитозана диализовали против воды, используя диализный мешок Spectra/Por® 3,5 кДа («Spectral Medical Industries», США). Выход лиофильновысушенного низкомолекулярного хитозана составлял 80 %.

Получение крабового низкомолекулярного N-сукцинил хитозана. Низкомолекулярный N-сукцинил хитозан был получен по методике [202] с некоторыми модификациями. 4 г исходного высокомолекулярного N-сукцинил хитозана растворяли в 300 мл 0,5 Н NaOH и изменяли рН раствора до значения 6,6, добавлением 30%-ной уксусной кислоты. Раствор выдерживали 30 мин при 45°С после чего добавляли ферментный комплекс S. kurssanovii. Гидролиз проводили в течение 1,5 ч. Реакцию останавливали кипячением раствора в течение 10 мин. Полученный гидролизат хитозана фильтровали и диализовали против дистиллированной воды, используя диализный мешок Spectra/Por® 3,5 кДа. Выход лиофильно высушенного

57

низкомолекулярного N-сукцинил хитозана составлял 80 %.

Получение хитина и хитозана из восковой моли Galleriamellonella

Депротеинирование. Кутикулу личинок восковой моли суспендировали в воде в соотношении 1:10, добавляли 40%-ный раствор NaOH до концентрации 2%, нагревали суспензию в интервале температур до 20-100° в течение 10-180 мин при постоянном перемешивании.

Оптимизацию процесса обесцвечивания ХМК с концентрацией суспензии 40% проводили под действием 0,5-10%-ных растворов перекиси водорода в присутствии 0,1н раствора NaOH, в интервале температур 20-80°С и продолжительности процесса 0,5-4 ч. По окончанию процесса твердых остаток обесцвеченного хитин-меланинового комплекса отделяли фильтрованием на капроновом фильтре, промывали до рН 7,0 и высушивали в сушильном шкафу при температуре 30 ± 5°С.

Оптимизацию процесса деацетилирования обесцвеченного ХМК с концентрацией суспензии 15% осуществляли с использованием 35-55%-ных растворов NaOH в интервале температур 60-140°С в течение 0,5-4 ч при постоянном перемешивании. По окончании процесса деацетилирования реакционную массу охлаждали до 40°С и фильтровали на капроновом и стеклянном фильтрах. Полученный высокомолекулярный хитозан промывали дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод и высушивали в сушильном шкафу при 30±5°С.