ЛИПИДНЫЙ СОСТАВ ТКАНЕЙ АТЛАНТИЧЕСКОГО ЛОСОСЯ SALMO SALAR L. КОЛЬСКОГО ПОЛУОСТРОВА
Л.А. Похольченко
Мурманский государственный технический университет, г. Мурманск, Россия
e-mail: ludapoh@yandex.ru
Из всех групп веществ, входящих в состав животных организмов, липиды наиболее быстро реагируют на изменения многих экологических факторов.
В течение первых лет жизненного циклалипидный обмен существенно меняется, обеспечивая адаптацию рыб к изменениям окружающей среды. К настоящему времени изучению липидов рыб посвящено много работ, но закономерности и
амплитуда изменчивости их состава на ранних этапах развития под влиянием внешних факторов изучены недостаточно.
Анализируются сведения по липидному составу тканей речной молоди атлантического лосося разного возраста из рек Западная Лица, Печа и Пак Кольского полуострова.
Материал и методика
Отбор биологических проб и их фиксация
Для исследования липидного состава брали мышечную ткань и печень молоди атлантического лосося Salmo salar L. Сбор материала осуществляли в августе 2008 г. на реках Печа, Пак (притоки реки Тулома) и Западная Лица Кольского полуострова. Пробы мышц и печени массой 1,0 и 0,5 г,
соответственно, фиксировали в 5 мл бинарного растворителя с ионолом и хранили при температуре
-18 °С без доступа воздуха и света до начала анализа не более 1 месяца. Общее количество исследуемых биологических проб лосося составило 56 штук.
Методика фракционирования липидов
Липиды из тканей экстрагировали по методу Блайя-Дайера (Кейтс, 1975). Фракционный состав липидов определяли методом одномерной ТСХ. Для анализа использовали пластинки с силикагелем на алюминиевой подложке фирмы «Merck» (Германия). Соотношение отдельных классов общих липидов изучали в системе н-гексан-серный эфир-ледяная уксусная кислота (90:20:1 (v/v/v)); фосфолипидов - хлороформ-метанол-вода (65:25:4 (v/v/v)). Идентификацию фракций липидов проводили при длине волны 540 нм на приборе CS-9000 фирмы «Shimadzu» (Япония) с помощью стандартов фирмы «Sigma» и «ISN» (США) (Кейтс, 1975).
Статистическую обработку полученных результатов проводили стандартными биометрическими методами с помощью стандартного пакета прикладных программ Microsoft Ехсєі и специальных программ (Лакин Г.Ф., 1990).Результаты и обсуждение
Исследований показали, что идентичные ткани молоди атлантического лосося незначительно отличаются друг от друга по общему содержанию липидов (табл. 1).
Таблица 1
Содержание липидов в тканях разновозрастной молоди атлантического лосося
| Название реки | Количество объектов | Содержание липидов, % от общего химического состава | |||||
| 0+* | 1+ | 2+ | |||||
| мышечная ткань | печень | мышечная ткань | печень | мышечная ткань | печень | ||
| р. Печа | 18 | 9,98±0,96 | 17,21±1,25 | 10,28±1,03 | 17,76±1,32 | 11,13±1,06 | 17,90±1,45 |
| р. Пак | 17 | 9,65±0,82 | 17,48±1,23 | 10,39±1,12 | 17,60±1,30 | 11,17±1,09 | 17,71±1,42 |
| р. Зап. Лица | 21 | 9,90±0,90 | 17,32±1,20 | 10,21±0,98 | 17,57±1,28 | 11,01 ±0,99 | 17,62±1,40 |
* 0+ - сеголетки, 1+ - двухлетки, 2+ - трёхлетки молоди атлантического лосося
Выделены такие липидные фракции, как диацилглицерины, триацилглицерины, свободные жирные кислоты, фосфолипиды, стерины и эфиры стеринов.
Основную долю липидов составили триацилглицерины, фосфолипиды и стерины (табл. 2).Таблица 2
Фракционирование липидов в тканях разновозрастного лосося из различных районов вылова
| Наименование фракции | р. Печа | р. Зап. Лица | р. Пак | |||||||||||
| 0+ | 1+ | 2+ | 0+ | 1+ | 2+ | 0+ | 1+ | 2+ | ||||||
| мыш цы | мыш цы | пече нь | мыш цы | мыш цы | мыш цы | пече нь | мыш цы | пече нь | мыш цы | мыш цы | пече нь | мыш цы | пече нь | |
| Диацилглицерин ы | 0,3 | 2,4 | 0,4 | 3,6 | 0,5 | 0,6 | 1,1 | 0,6 | 1,4 | 1,0 | 2,6 | 0,5 | 1,5 | 1,4 |
| Триацилглицери ны | 9,0 | 10,0 | 32,0 | 28,4 | 12,0 | 18,0 | 40,0 | 33,8 | 52,0 | 23,6 | 28,9 | 63,0 | 33,0 | 19,0 |
| Свобод. жирные к-ты | 2,0 | 7,4 | 4,4 | 6,2 | 2,0 | 2,9 | 2,0 | 13,3 | 1,5 | 1,5 | 2,5 | 1,2 | 13,0 | 2,7 |
| Стерины | 19,0 | 20,0 | 16,0 | 18,4 | 14,0 | 17,0 | 9,7 | 1,4 | 12,7 | 15,6 | 13,4 | 7,4 | 15,0 | 15,0 |
| Эфиры стеринов | 4,6 | 2,6 | 4,1 | 1,8 | 1,5 | 2,0 | 4,5 | 6,0 | 3,2 | 3,7 | 1,9 | 1,6 | 2,5 | 1,7 |
| ФОСФОЛИПИД Ы, в т . ч .: | 65,0 | 57,0 | 43,0 | 41,4 | 70,0 | 59,0 | 43,0 | 44,8 | 29,0 | 54,5 | 50,7 | 26,0 | 35,0 | 61,0 |
| Фосфатидилхоли н (лецитин) | 33,1 | 36,3 | 27,7 | 23,5 | 45,5 | 35,6 | 26,7 | 26,4 | 16,2 | 33,2 | 31,1 | 15,2 | 12,5 | 34,5 |
| Фосфатидилэтан оламин (кефалин) | 11,6 | 13,4 | 13,0 | 12,2 | 18,5 | 18,3 | 15,0 | 16,7 | 10,8 | 19,1 | 8,8 | 7,8 | 12,8 | 18,8 |
| Другие ФЛ | 20,2 | 7,3 | 2,3 | 5,7 | 6,0 | 5,1 | 1,0 | 1,7 | 2,0 | 2,3 | 10,8 | 2,9 | 9,7 | 7,2 |
Анализ липидного состава мышечной ткани и печени молоди атлантического лосося показал, что содержание фосфолипидов в них превалирует над содержанием триацилглицеринов.
Тенденция, ведущая к преобладанию доли фосфолипидов над триацилглицеринами, прослеживается отчетливо в мышечной ткани и печени рыб, более эволюционно совершенных.1. Триацилглицерины. Исследования показали, что с возрастом количество триацилглицеринов увеличивается как в мышечной ткани, так и в печени (с 9,0 до 33,8 % и с 18,0 до 63,0 % от общего содержания липидов, соответственно). Это связано с тем, что триацилглицерины - одна из универсальных запасных форм липидов, потребность в которых с возрастом повышается в связи со многими энергетическими затратами ( Чечеткин , 1982).
2. Фосфолипиды. Общее содержание фосфолипидов в мышечной ткани молоди лосося из р.р. Западная Лица, Печа и Пак и печени молоди р.р. Печа и Западная Лица с возрастом уменьшается (с 70,0 до 35,0 % и с 43,0 до 29,0 % от общего содержания липидов, соответственно), а печени молоди реки Пак увеличивается (с 26,0 до 61,0 %). Диапазон изменчивости этого показателя существенно различается для каждой реки, что может быть связано с влиянием экологических факторов, например, с различиями в качественном составе кормовой базы. Основными компонентами фосфолипидов мышечной ткани молоди являются лецитин (до 36 % от общего количества липидов) и кефалин (до 19,1 %). Лецитин и кефалин - наиболее лабильные и быстро обменивающиеся фосфолипиды, способные выполнять, кроме запасной, и энергетическую функцию в клетке (Чечеткин, 1982), что косвенно свидетельствует о высокой двигательной активности и жизнеспособности дикой молоди лосося в речной период жизни.
3. Стерины. Установлено, что с возрастом в мышечной ткани количество стеринов (в частности, холестерина) уменьшается (с 20,0 до 15,0 % от общего содержания липидов), а в печени увеличивается (с 7,4 до 15,0 %). Холестерин необходим для построения клеточных мембран и для синтеза веществ стероидной природы и желчных кислот, он является запасным липидом и накапливается в печени (Чечеткин, 1982).
Таким образом, установлены различия во фракционном составе липидов тканей исследованных рыб.
Триацилглицерины наиболее быстро количественно реагируют на экологические факторы. Фосфолипиды накапливаются с возрастом.Литература
Анисимов, А.А., Леонтьева, И.Ф. Основы биохимии : учебник для студ. биол. спец. ун-тов. - М. : Высш. шк., 1986. - 551 с.
Добрынина, В.И. Учебник биологической химии. - М. : Гос. из-во мед. лит-ры, 1963. - 448 с.
Кейтс, М. Техника липидологии. Выделение, анализ и идентификация липидов / пер. с англ. Вавера
В.А.- М. : 1975. - 322 с.
Кольман Я., Рём К.-Г., Наглядная биохимия, М. :Мир, 2000.
Лакин, Г.Ф. Биометрия : Учеб. пособие для биол. спец. вузов - 4-е изд., перераб. и доп. - М. : Высш. шк., 1990. - 352 с. : ил.
Ленинджер А. Основы биохимии, М. : Мир, том 1-3, 1985.
Чечеткин, А.В., Головацкий, И.Д. Биохимия животных. - М. : Высш. шк., 1982. - 511 с.
Elliott W.H., Elliott D.S., Biochemistry and molecular biology, Oxford University Press, Oxford, England, 1997.
Stryer L., Biochemistry, (4th ed.), Freeman W.H., New York, NY, 1995.