СРАВНЕНИЕ ЛИПИДНЫХ СПЕКТРОВ СЕГОЛЕТОК АТЛАНТИЧЕСКОГО ЛОСОСЯ Salmo salar L. ИЗ ДВУХ БИОТОПОВ ПРИТОКА АРЕНЬГА (р. Варзуга, Кольский п-ов)
Д.С. Павлов, З.А. Нефедова, А.Е. Веселов, О.Б. Васильева, Т.Р. Руоколайнен, П.О. Рипатти, Н.Н. Немова
Учреждение Российской академии наук, Институт биологии Карельского научного центра РАН, г.
Петрозаводск; e-mail: znefed@krc.karelia.ruВведение
Ранее нами описаны условия формирования устойчивых фенотипических групп сеголеток лосося, обитающих в разных типах выростных участков реки Варзуга (Павлов и др., 2007). Были выявлены отличия в накоплении отдельных фракций липидов и жирных кислот в зависимости от местообитания, которые в итоге, к концу лета, отражались на размерно-весовых показателях фенотипических групп сеголеток (Павлов и др., 2008). Можно предположить, что в последующем эти различия усиливаются или модифицируются, влияя на сроки смолтификации. В связи с этим представляет интерес проследить дифференцировку сеголеток (0+) лосося по липидному статусу (состоянию комплекса показателей липидного обмена) возникающую уже в первые две недели после активного расселения и перехода личинок в стадию малька. Липидный статус можно рассматривать как один из механизмов формирования внутрипопуляционной разнокачественности атлантического лосося в протяженных и сложных по геоморфологии реках.
Цель данного исследования состояла в сравнительном изучении липидного статуса сеголеток лосося после распределения их из нерестовых гнезд на места постоянного обитания. Сравнивали липидные спектры сеголеток (0+) лосося, не имеющих к концу июня различий в размерно-весовых характеристиках, но обитающих в двух различных по гидрологическим условиям биотопах притока Ареньга (р. Варзуга). Мальки одной генерации после выклева в главном русле р. Варзуга переместились в устье притока Ареньга, а молодь другой генерации выклюнулась в грунте порогового участка р. Ареньга и скатилась ближе к устью на участок под водопадом.
Материал и методы
Сбор молоди атлантического лосося с двух участков, расположенных в устье и под водопадом в р.
Ареньга (66°32'5 c.m., 36°15'5 в.д.) осуществляли 22 июня 2006 г с помощью аппарата электролова (Fa-2) норвежского производства.Индивидуальные пробы сеголеток, по 30 экз. с каждого биотопа, тщательно измельчали и фиксировали 96% этиловым спиртом, затем добавляли смесь хлороформ-метанол (2:1) и хранили до анализа в холодильнике при температуре +4°C (Folch et al., 1957). Выделенные общие липиды (Р1) сушили до постоянного веса в эксикаторе над фосфорным ангидридом (P2O5) в холодильной камере (при +4°C). Обезжиренный остаток (Р2), включающий белки, углеводы, нуклеиновые кислоты, аминокислоты и микроэлементы, также сушили до постоянного веса, но при комнатной температуре.
Общие липиды разделяли на липидные фракции: суммарные фосфолипиды (ФЛ), триацилглицерины (ТАГ), холестерин (ХС), эфиры холестерина (ЭХС). При этом использовали тонкослойные хроматографические пластинки «Silufol» («Kavalier», Чехия) и систему растворителей: петро- лейный эфир - серный эфир - уксусная кислота (90:10:1). Количество ФЛ и ТАГ определяли гидро- ксаматным методом (Сидоров и др., 1972), ХС и ЭХС - по реакции с окрашенным реагентом (Engelbrecht et al., 1974), оценивая в процентах от сухой массы пробы (Р1+Р2).
Состав индивидуальных фосфолипидов - фосфатидилсерин (ФС), фосфатидилэтаноламин (ФЭА), фосфатидилхолин (ФХ) и лизофосфатидилхолин (ЛФХ) анализировали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (Агйиіпі et el., 1996) на стальной колонке Nucleosil 100-7 («Элсико», Москва), используя элюент - ацетонитрил-гексан-метанол-ортофосфорную кислоту (918:30:30:17,5). Детектирование проводили по степени поглощения световой длины волны 206 нм. Соотношение между компонентами оценивали по величинам площадей пиков на хроматограмме.
Содержание жирных кислот (ЖК) общих липидов определяли методом газожидкостной хроматографии в виде их метиловых эфиров после прямой эстерификации в метаноле (Новак, 1978). Разделение проводили на хроматографах «Кристалл 5000» («Хроматек», Йошкар-Ола) с пламенноионизационным детектором в капиллярной колонке ZB-FFAP длиной 50 м, с внутренним диаметром 0,32 мм и толщиной слоя жидкой фазы 0,50 мкм.
Достоверность различий выборок оценивали по U-критерию Манна-Уитни (Лакин, 1990).
Результаты и обсуждение
Оценка липидного статуса сеголеток лосося из двух биотопов притока Ареньга показала отсутствие достоверных различий по содержанию общих липидов, в том числе ХС, ТАГ, суммы насыщенных и моноеновых ЖК. У сеголеток, отловленных под водопадом, по сравнению с устьевыми мальками установлен пониженный уровень ЭХС и повышенный суммарных фосфолипидов, ФС, ФЭА и ФХ, а доля ЛФХ снижена. Все различия достоверны (p