<<
>>

  3.2.4. Определение прочности связывания хитозана с клетками M.smegmatis

  Для определения прочности связывания хитозана с клетками M.smegmatisиспользовали трехкратную отмывку клеток бактерий предварительно проинкубированных при температуре 37°С с хитозаном с Мг| равной 4 кДа и СД 85%, смесью из 0,1 М ацетатного буфера (рН 6,8) и 0,5 М NaCl.
Результаты предварительных опытов показали, что 0,5 М NaCl не вызывает гибели микобактерий. В то же время не исключено, что хлорид натрия способен разрушить ионные взаимодействия, возникшие в течение 1-часовой инкубации между клетками М. smegmatisи хитозаном, вследствие чего хитозан перейдет в супернатант, и, как следствие, после отмывки количество жизнеспособных клеток увеличится. Однако данные этого опыта показали, что воздействие хлорида натрия не оказывает существенного влияния на связывание хитозана с микобактериями. Выживаемость клеток осталась без изменений (результаты не приводятся).

В результате колориметрических исследований было показано, что количество хитозана в супернатанте было минимальным, то есть практически весь хитозан остался связанным с микобактериями. Таким образом, можно сделать вывод, что хитозан в силу своей поликатионной природы, прочно связан с внешней мембраной микобактерий электростатическими и другими силами.

Кроме того, была сделана попытка «снять» с клеток М. smegmatis

93

хитозан с помощью детергентов. Использование 0,1%-ных растворов Твин 20 и Твин 80 для отмывки клеток микобактерий от хитозана, показало, что детергент сам по себе вызывает гибель клеток на 20% (Твин 20) и на 42% (Твин 60). Известно, что аналогичным образом используемые нами детергенты вызывали гибель клеток Ent. agglomeransпри отмывании от хитозана [129].

<< | >>
Источник: ОСТАНИНА ЕКАТЕРИНА СЕРГЕЕВНА. ТЕХНОЛОГИЯ ПЕРЕРАБОТКИ ВОСКОВОЙ МОЛИ, ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ СВОЙСТВ ХИТОЗАНА И ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ С ЛИПОЛИТИЧЕСКИМИ ФЕРМЕНТАМИ. Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук. Щёлково-2007. 2007

Еще по теме   3.2.4. Определение прочности связывания хитозана с клетками M.smegmatis:

  1.   3.2.5. Определение МИК хитозана  
  2. 22.2. Определение механической прочности
  3.   Определение степени деацетилирования хитозана.  
  4. Определение предела прочности на отрыв получаемой смеси
  5. Методика отбора проб полученной бетонной смеси, оценка её качества при определении значений предела прочности на сжатие контрольных образцов бетона
  6. Определение суммы «предела безопасности» (или «запаса прочности») предприятия, т. е. размера возможного снижения объема реализации продукции в стоимостном выражении при неблагоприятной конъюнктуре товарного рынка, который позволяет ему осуществлять прибыльную операционную деятельность.
  7.   3.2.7.Противотуберкулезная активность хитозана
  8.   1.6. Антибактериальная активность хитозана
  9. Технологии получения хитина и хитозана
  10. Оценка активности ацетилхолинэстеразы в Т-клетках
  11. Макромолекулы грибковой клетки
  12. Естественные клетки-киллеры
  13.   3.2. Изучение антибактериальных свойств хитозана
  14. Перемещение всей клетки в окружающей среде
  15. Органеллы грибковой клетки
  16.   1.4. Получение хитина и хитозана из насекомых
  17. Механизм действия гормонов на клетки-эффекторы
  18. Тема: Нарушения обмена веществ в организме и его тканях. Патология клетки. (4 часа)