4.2 Закономерности концентрирования сывороточных белков
Проведенные исследования по оптимизации сочетаний мембранных технологических процессов с целью получения сывороточных концентратов с регулируемым белково-углеводным и минеральным составом выявили следующие возможные рациональные схемы технологических процессов:
- обратный осмос - ультрафильтрация;
- обратный осмос - электродиализ - ультрафильтрация;
- ультрафильтрация - электродиализ.
Концентрирование подсырной сыворотки обратным осмосом при температуре 28-30°С и давлении 2,6-3,2 МПа позволяет получить продукт следующего состава (таблица 4.2.1).
116
Таблица 4.2.1 - Состав сыворотки и ее фильтрата, полученных при концентрировании обратным осмосом (X±т; тlt;0,05)
|
Показатели |
Исходная |
Концентраты |
Фильтрат |
|
|
Массовая доля, %: |
|
|
|
|
|
сухих веществ |
6,10 |
12,00 |
18,6 |
0,10 |
|
небелковых азотистых веществ |
0,20 |
0,36 |
0,54 |
0,06 |
|
белков |
0,60 |
1,20 |
1,83 |
0,00 |
|
лактозы |
4,50 |
8,94 |
13,80 |
0,03 |
|
молочного жира |
0,06 |
0,12 |
0,18 |
0,00 |
|
молочной кислоты |
0,14 |
0,28 |
0,45 |
0,00 |
|
зола |
0,56 |
1,08 |
1,78 |
0,01 |
Дальнейшее проведение процесса приводит к высокой концентрационной поляризации на поверхности мембран вследствие вязкостных и гидродинамических условий истечения продукта.
Таблица 4.2.2 - Вязкостные характеристики сыворотки (туї О"3, Па-с), концентрированной обратным осмосом (X±т; тlt;0,05)
|
Градиент скорости, с"1 |
Массовая доля сухих веществ, % |
|||||
|
6,0 |
12,0 |
20,0 |
||||
|
20°С |
50°С |
20°С |
50°С |
20°С |
50°С |
|
|
84 |
3,28 |
2,09 |
2,92 |
2,48 |
4,01 |
2,76 |
|
729 |
1,15 |
0,82 |
1,66 |
0,98 |
2,98 |
1,36 |
|
1312 |
1,04 |
0,62 |
1,60 |
0,80 |
2,82 |
1,24 |
Решение задачи сочетания технологических схем определяется выявлением эффективного уровня концентрирования в процессе обратного осмоса и ультрафильтрации, а также оценкой параметров циркуляции растворов в электродиализной установке.
Критерием оценки могут служить вязкостные характеристики концентрата (рисунок 4.2.1) и скорость фильтрации.
117
10 9 8
24
О
h О
О
о К
05
Ж Я
н
•9-
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
/ |
/ |
|
|
|
|
|
|
|
|
У, |
/ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 Массовая доля сухих веществ, %
Рисунок 4.2.1 - Зависимость эффективной вязкости УФ-концентратов с различной массовой долей сухих веществ при скорости сдвига 1312 с'1 и температуре: 1 - 20°С; 2 - 50°С
Следует отметить, что увеличение вязкости происходит во всем исследуемом интервале, однако в концентратах с массовой долей сухих веществ 18,0-20,0% значения ее резко возрастают.
При концентрировании обратным осмосом для аналогичных значений сухих веществ вязкость является сопоставимой. Таким образом, объяснимо резкое снижение скоростей фильтрации, как при обратном осмосе, так и ультрафильтрации после обозначенного уровня.Сравнение характеристических данных вязкости концентратов, полученных при обратном осмосе и ультрафильтрации с массовой долей сухих веществ 20,0% позволяет сделать вывод о критичности дальнейшего фракционирования их ультрафильтрацией с целью получения высокобелковых продуктов. Предложенная нами схема обратный осмос - ультрафильтрация использована при получении азотистых веществ до 35,0% в сухом продукте.
В дальнейшем исследовали особенности мембранного фракционирования белков молочной сыворотки в процессе ультрафильтрации без предкон-центрирования. В результате проведенных экспериментов выявлены зависимости изменения массовых долей сухих и азотистых веществ (рисунок 4.2.2). Установлена эффективность концентрирования сывороточных белков методом ультрафильтрации до 55,0% в сухом веществе (18,0%) сухих веществ).
118
|
|
75 |
|
о4 |
|
|
К |
20 |
|
Ц |
|
|
о |
15 |
|
со |
10 |
|
о |
|
|
о |
|
|
о cd |
ь |
|
2 |
0 |
О 4 8 12 16 20 24 Фактор концентрирования
Рисунок 4.2.2 - Содержание сухих веществ (1), общего (2), белкового (3) азота и лактозы (4) в концентратах сывороточных белков
По мере повышения фактора концентрирования происходит увеличение содержания всех основных компонентов молочной сыворотки, особенно в значительной степени азотистых веществ.
Помимо этого установлено, что темп повышения массовой доли жира в концентрате превалирует над темпом концентрирования азотистых веществ, что обусловлено практически полной селективностью мембран по жиру. Данный факт обусловлен размерами молекул концентрируемых компонентов, в частности сывороточных белков и жировой фазы. Эквивалентные размеры последней превосходят на два-три порядка аналогичные характеристики сывороточных белков [245].Увеличение абсолютного содержания лактозы в концентрате, по сравнению с исходной сывороткой, указывает на селективность мембран по отношению к этому компоненту. Несмотря на увеличение абсолютной массовой доли лактозы и золы в белковом концентрате, относительное содержание их (в пересчете на сухое вещество) уменьшается. Так, при массовой доле сухих веществ 10 и 20% массовая доля лактозы снижается на 30 и 65%, а золы на 20 и 40%, соответственно. Отметим, что такое содержание золы в сухом остатке белковых концентратов превышает в 2-3 раза аналогичный показатель, характерный для большинства пищевых продуктов.
Учитывая результаты, приведенные на рисунке 4.2.2, можно отметить, что для получения концентрата сывороточных белков с массовой долей азо-
119
тистых веществ 35% и 55% в сухом остатке необходимо, чтобы содержание сухих веществ в концентрате после ультрафильтрации находилось в пределах 9,7-10,3 и 17,8-18,2%, соответственно.
Выявлено, что увеличение массовой доли сухих веществ с 18-20 до 24% ведет к снижению скорости ультрафильтрации, несмотря на относительно высокую скорость циркуляции раствора в аппарате, что является следствием высокой концентрационной поляризации на поверхности мембран. При известной селективности мембран количественный состав УФ-концентратов будет зависеть в основном, от состава исходного сырья - белка, лактозы, жира и золы.
Нами показано, что при концентрировании сывороточных белков методом ультрафильтрации часть из них непременно переходит в фильтрат в зависимости от размеров молекул и селективности мембран.
Поэтому представляет особый интерес определение компонентного состава сывороточных белков с целью выявления изменений в их соотношении в процессе концентрирования и оценки полученного продукта.Таблица 4.2.3 - Фракционный состав сывороточных белков ультрафильтратов
|
Массовая доля, % |
Массовая доля азота (N*6,38), % |
||||||
|
сухих веществ |
белковых азотистых веществ |
иммунных глобулинов |
а-лакталь-бумина |
(3-лактоглобулина |
минорных белков |
||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
||||
|
6,0 |
0,65 |
0,065 |
0,186 |
0,149 |
0,166 |
0,042 |
0,042 |
|
10,0 |
2,6 |
0,308 |
0,693 |
0,618 |
0,618 |
0,170 |
0,175 |
|
14,5 |
5,9 |
0,735 |
1,502 |
1,441 |
1,430 |
0,389 |
0,402 |
|
18,0 |
9,5 |
1,309 |
2,384 |
2,345 |
2,175 |
0,628 |
0,659 |
|
24,0 |
14,0 |
1,956 |
3,236 |
3,841 |
3,490 |
0,753 |
0,724 |
Компонентный состав сывороточных белков определен с применением диск-электрофореза.
Идентификацию проводили, используя данные об их относительной электрофоретической подвижности в полиакриламидном ге-
120
ле. В таблице приведен компонентный состав сывороточных белков при различной концентрации сухих веществ ультрафильтратов. Компоненты, обозначенные индексами 3 и 4, являются минорными и располагались после (3-лактоглобулина.
В результате проведенных исследований установлено, что по мере концентрирования сухих веществ происходит увеличение всех белковых фракций в концентрате. По мере концентрирования белковых азотистых веществ происходит изменение соотношения в компонентном составе сывороточных белков. Удаление части а-лактальбулина подтверждают электрофо-реграммы фильтрата молочной сыворотки. Это можно объяснить меньшим молекулярным весом а-лактальбулина (в сравнении с (3-глобулином (1) и, тем более, иммунными глобулинами) и вероятно более компактным его строением, что приведет к частичному переносу его в фильтрат.
Параллельно с исследованиями по фракционному составу, проводили определение аминокислотного состава сывороточных белковых концентратов с целью оценки их биологической ценности, а также изменений в содержании и соотношении аминокислот. Параметры аминокислотного состава сывороточных белковых концентратов представлены в таблице 4.2.4.
Таблица 4.2.4 - Аминокислотный состав сывороточных концентратов
|
Наименование аминокислот |
Массовая доля аминокислоты (мг/100 г) в ультрафильтрате с массовой долей сухих веществ, % |
||
|
6,0±0,2 (контроль) |
10,2+0,2 |
20,1+0,4 |
|
|
Незаменимые аминокислоты |
|||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
|
Валин |
41+3 |
179+15 |
602+60 |
|
Изолейцин |
40+7 |
162+80 |
540+64 |
|
Лейцин |
62+5 |
3200+200 |
6930+700 |
|
Лизин |
46+3 |
2350+150 |
6090+600 |
|
Метионин |
11+1 |
390+40 |
1840+200 |
121
Продолжение таблицы 4.2.4
|
1 |
2 |
3 |
4 |
|
Треонин |
43+3 |
2050±150 |
5660+500 |
|
Фенил аланин |
16+8 |
920+100 |
3620+400 |
|
Заменимые аминокислоты |
|||
|
Аланин |
34+3 |
1250+120 |
3050+30 |
|
Аргинин |
23+5 |
750+40 |
2400+250 |
|
Аспарагиновая кислота |
60+2 |
2690+250 |
7600+700 |
|
Гистидин |
9+1 |
510 + 50 |
1810+200 |
|
Глицин |
14+1 |
470+50 |
1540+150 |
|
Глютаминовая кислота |
102+10 |
4800+450 |
12280+1000 |
|
Пролин |
45+4 |
256+20 |
8180+700 |
|
Серии |
36+3 |
163+15 |
3900+40 |
|
Тирозин |
14+1 |
82+8 |
362+35 |
|
Цистин |
4+1 |
143+15 |
493+50 |
Анализ полученных результатов, приведенных в таблице 4.2.4, показал, что в процессе ультрафильтрации происходит увеличение всех представленных аминокислот и, что особенно ценно, таких незаменимых аминокислот, как лизин, изолейцин, треонин и других. При этом соотношение суммы заменимых аминокислот к сумме незаменимых остается практически постоянным. Из представленного общего количества аминокислот незаменимые аминокислоты (без учета триптофана) составляют до 42%. Таким образом, сывороточные белковые концентраты являются богатым источником серосодержащих аминокислот, что особенно важно при использовании в детских, диетических и других продуктах питания.
Анализ химических показателей фильтрата выявил, что массовая доля его сухих веществ составляет 5,4+0,2%, при этом массовая доля лактозы колеблется от 4,0 до 4,4%, а азотистых веществ до 0,32%. Очевидно, что наиболее перспективным направлением использования фильтра является перера-
122
ботка его на углеводосодержащие концентраты. До 90-х годов XX в направление создания концентратов из молочной сыворотки было связано с получением сгущенных концентратов и сухих препаратов молочного сахара. В дальнейшем фильтрат молочной сыворотки нашел применение в технологии глюкозо-галактозных сиропов, а также препаратов лактулозы.
Обобщая результаты экспериментов по концентрированию белков из молочной сыворотки, следует заметить, что в процессе ультрафильтрации можно получить продукт с широким интервалом азотистых веществ (до экономически оправданных пределов) и с необходимым соотношением «сывороточные белки - лактоза».
Еще по теме 4.2 Закономерности концентрирования сывороточных белков :
- 4.3 Минеральный состав концентратов сывороточных белков
- 4.4 Структурно-механические характеристики концентратов сывороточных белков
- Сывороточная активность лизоцима
- Общие закономерности нормального и отклоняющего развития психики. Модально-неспецифические и Модально-специфические закономерности дизонтогенеза.
- 1.1 Теоретические основы мембранного концентрирования
- 1.3 Концентрирование компонентов из молочной сыворотки
- Особенности белкового обмена детей.
- 1.3.2 Характеристика технологических процессов концентрирования компонентов молочной сыворотки
- IV.7.3. Химическая структура белков
- 5.5 Изменение физико-химических и микробиологических показателей сывороточных концентратов в процессе электродиализа
- Получение белковых веществ из некоторых видов нетрадиционного сырья