Тема: Воспаление

Воспалительный ответ наступает в васкуляризированной

соединительной ткани и включает плазму, циркулирующие клетки, кровеносные сосуды клеточные и внеклеточные составляющие

соединительной ткани.

Главным феноменом в остром воспалении является сосудистый феномен. Острое воспаление включает 1) альтерацию в сосудистом русле, которая ведет к ускорению кровотока, 2) структурные изменения в микроциркуляции, ведущие к выходу белков и лейкоцитов из крови, 3) аккумуляцию белков и лейкоцитов в фокусе повреждения.

Развитие непостоянной и транзиторной вазоконстрикции артериол продолжается несколько секунд, после чего наступает вазодилятация. Существуют 6 механизмов увеличения проницаемости микрососудов. 1) сокращение эндотелиальных клеток (под влиянием гистамина, брадикинина, лейкотренов и др.). Повреждаются только венулы 20-60 мм в диаметре; 2) цитоскелетная и межклеточная реорганизация; 3) прямое повреждение эндотелия, приводящее к некрозу эндотелиальной клетки и отторжению; 4) поражение эндотелия, обусловленное лейкоцитами; 5) секреция из регенерирующих капилляров, которые долго остаются проницаемыми; 6) увеличение трансцитоза с везикулами и вакуолями.

Главной функций воспаления является доставка лейкоцитов в участку повреждения. Экстравазация лейкоцитов может быть разделена на несколько этапов: 1) краевое стояние в просвете сосуда, кружение и адгезия; 2) прохождение лейкоцита через эндотелий (диапедез), 3) миграция лейкоцита в интерстициальную ткань в направлении химических стимулов.

В эмиграции лейкоцитов участвуют молекул адгезии: селектины интегрины (иммуноглобулины).

Далее после эмиграция лейкоцитов хемотаксисом определяется как ориентированное движение вдоль химического градиента. Хемоаттрактантами являются компоненты системы комплемента, продукты липооксигеназного пути, главным образом лейкотриена B4 и цитокины, особенно IL8.

Фагоцитоз и освобождение ферментов нейтрофилами и макрофагами составляют два главных события при аккумуляции лейкоцитов в воспалительном фокусе. Гибель бактерий при фагоцитозе сопровождается кислород-зависимыми механизмами. Фагоцитоз стимулирует взрыв в потреблении кислорода, гликогенозе. увеличении окисления глюкозы через гексозо-монофосфатный шунт и продукцию реактивных кислородных метаболитов.

В воспалении играют большую роль химические медиаторы, освобождаемые из тучных клеток. Стимулами для дегрануляции тучных клеток являются: 1) физическое повреждение, такое как травма, холод, жар; 2) иммунные реакции, вызывающие прикрепление антител к тучным клеткам; 3) фрагменты комплемента, называемые анафилотоксинами (С3 и С5ф); 4) гистаминосвобождающиеся протеины из лейкоцитов; 5) цитокины (IL-1, IL-8).

В дальнейшем продукты распада в очаге воспаления стимулируют фагоцитарную активность макрофагов. Одновременно происходит их размножение и метаплазия в фибробласты и фиброциты. Образуется богатая сосудами гранулярная ткань, которая постепенно превращается в рубец.

Цель: Изучить патологические сдвиги и морфологические характеристики в очаге воспаления.

Опыт 1. Изучение протеолитической активности гноя.

Методика: В 6 пробирках развести гной. Методика разведения гноя: В 6 пробирок налить по 1 мл физиологического раствора. Затем в пробирку № 1 добавить 1 мл гноя, в разведении 1:10, после чего, размешав содержимое пробирки № 1, взять из нее 1 мл смеси и перелить в пробирку № 2. Аналогичным способом из нее взять 1 мл смеси, перелить в пробирку № 3 и т. д. Для создания идентичных условий опыта из последней пробирки удалить 1 мл смеси.

В каждую пробирку добавить по 2 мл 0,25% раствора казеина и поместить в термостат. Затем после извлечения штатива с пробирками из термостата добавить осторожно (по стенке пробирки) по 5 — 6 капель уксусной кислоты. Отметить наличие или отсутствие помутнения содержимого разных пробирок (помутнение наблюдают при неполном переваривании белка).

Результаты запротоколировать и занести в таблицу. На основании полученных данных сделать вывод о наличии или отсутствии протеолитической активности у гноя.

Опыт 2. Изучение изменения кровообращения в очаге воспаления.

Методика: У наркотизированной гексеналом лягушки приготовить препарат брыжейки кишки и изучить характер кровообращения в ее сосудах. Затем раскаленной на спиртовке иглой нанести ожог вблизи участка сосудистой сети, находящейся в поле зрения.

Зарисовать увиденные нарушения микроциркуляции в брыжейке кишки. Объяснить их механизм возникновения.

Самостоятельно решить кроссворд. (см. Приложение № 2)

Программированный контроль знаний с использованием тестовых заданий.

Укажите правильный ответ

26. Какие признаки свидетельствуют о наличии воспалительного

процесса в организме?

а) лейкоцитоз

б) лихорадка

в) увеличение СОЭ

г) увеличение содержания гамма-глобулинов в сыворотке крови

д) накопление в крови С-реактивного белка

е) все указанные признаки

27. Воспаление рассматривается как адаптивная реакция

организма, потому что:

а) отграничивает место повреждения, препятствуя распространению флогогенного фактора и продуктов альтерации в организме

б) инактивирует флогогенный агент и продукты альтерации тканей

в) мобилизует специфические и неспецифические факторы зашиты организма

г) способствует восстановлению или замещению повреждённых

тканевых структур

д) все ответы верные

28. Укажите медиаторы воспаления, клеточного происхождения:

а) цАМФ, цГМФ, серотонин, лимфокины, гистамин, лизосомапьные ферменты, лизосомальные катионные белки, простагландины

б) факторы свертывания крови, кинины, комплемент

29. Укажите медиаторы воспаления гуморального

происхождения:

а) цАМФ, цГМФ, серотонин, лимфокины, гистамин, лизосомапьные ферменты, лизосомальные катионные белки, простагландины

б) факторы свертывания крови, кинины, комплемент

ВОПРОСЫ для самоподготовки.

1. Воспаление. Этиология, основные внешние признаки воспаления.

2. Классификация воспаления.

3. Альтерация в очаге воспаления. Медиаторы воспаления.

4. Нарушения микроциркуляции в очаге воспаления.

5. Экссудация. Эмиграция лейкоцитов в очаг воспаления. Фагоцитоз.

6. Пролиферация в очаге воспаления.

7. Патогенез хронического воспаления

8. Исходы воспаления. Биологический смысл воспаления.

ЗАНЯТИЕ 7

Тема: Патология тканевого роста Экспериментальное воспроизведение и изучению опухолей

Основными законами формирования злокачественных опухолей являются:

1) Нелетальное генетическое поверждение (мутация), возникающая под влиянием факторов окружающей среды (химические вещества, радиация, вирусы, наследственная патология. Опухоль является результатом клонирования первого потомства клетки, т.е. опухоли моноклональны;

2) Г лавными мишенями генетического повреждения являются два класса регуляторных генов - усиливающих рост протоонкогенов и ингибирющих рост - канцеросупрессорных генов (анти-онкогены). Мутантные аллели протоонкогенов устойчиво доминанты. В отличие от этого у гена-супрессора опухоли оба нормальные алели должны быть трансформированы, вследствие чего эти гены становятся рецессивными онкогенами;

3) Теретья категория генов контролирует запрограммированую смерть клетки или апоптоз.

Протоонкогены могут становиться онкогенами путем ретровирусной трансформации (v-oncs) или путем влияния на конвертирование их in situ в клеточные онкогены (c-oncs).

Гены супрессоры рака

Если протоонкогены кодируют протеины, увеличивающие рост клетки, гены - супрессоры вызывают полом пролиферации.

Объяснение образования рецессивных генов-супрессоров дано в теории онкогенеза KnudsonX который предложил новую гипотезу онкогенеза, известную как «два удара». Он предположил, что одно генетическое изменение «первый удар» наследуется от родителей и поэтому имеется во всех соматических клетках тела, в то время как вторая мутация («второй удар») наслаивается на первую мутацию. Гипотеза Кнудсона доказана путем цитогенетического или молекулярного исследования.

Одним из наиболее часто встречающихся мутированных генов- супрессоров является ген Rb. Дети, носители наследственной мутации Rb аллеля во всех соматических клетках, являются совершенно нормальными (за исключением риска возникновения рака). Поскольку такой ребенок гетерозиготен в Rb локусе, предполагается, что гетерозиготность для Rb гена не нарушает поведения клетки. Рак заболевания возникает, если клетка становится гомозиготной для мутантного аллеля. Поскольку Rb ген ассоциирован с раком при гибели нормальных копий, иногда он обозначается, как «рецессивный раковый ген».

Примером некоторых генов - супрессоров опухоли является ген р53. Ген р53 - единственный наиболее распространенный в плане генетической альтерации, приводящий к раку человека. Гомозиготную потерю гена р53 находят в 53% рака кишечника, 30-50% рака молочной железы и 50% рака легких - трех «наиважнейших» локализаций рака. Мутации р53 найдены при возникновении различных неоплазм, включая лейкемии, лимфому, саркому, нейрогенные опухоли.

Гены, регулирующие апоптоз

В течение многих лет онкоген и ген-супрессор рака играли главную роль в понимании молекулярного базиса канцерогенеза. Хотя они действуют абсолютно по-разному, фактически гены, относящиеся к этим обоим классам, регулируют клеточную пролиферацию. Только недавно стало понятным, что гены, предупреждающие или индуцирующие программированную гибель клетки, играют также роль в развитии рака.

Примером таких генов является ген bcl-2. Механизмами, до конца не выясненными, bcl-2 предупреждает программированную смерть клетки. Предполагается, что усиление функции bcl-2, удлиняя время выживания клетки, позволяет проявиться другим мутациям, вызываемыми протоонкогенами, и генами-супрессорами. Бихимическая основа действия bcl-2 полностью не проливает свет на процесс. Полагают, что во многих случаях апоптоз является результатом летального поражения, обусловленного продуктами свободно-радикального и перекисного окисления липидов и, что bcl-2 ингибирует апоптоз путем усиления антиоксидантного пути.

Цель: Изучение методов перевивки опухолей и свойств опухолевой ткани и механизмов антибластомной резистентности. Изучение морфологических характеристик опухолей.

Опыт 1. Ознакомление с методом воспроизведения опухолей путем перевивки малигнизированной ткани.

Методика: За 2 недели до занятия мышь с саркомой «Рокера» наркотизировали эфиром, фиксировали к препаровальному столику и выстригали шерсть над опухолью. Кожу смазывали йодом, дели разрез, извлекали кусочек опухоли. Вырезанный кусочек, в стерильных условиях промывали физиологическим раствором в чашке Петри, а затем тщательно измельчали ножницами. Полученную тканевую взвесь в небольшом количестве физиологического раствора набирали в шприц и вводили 0,3—0,5 мл под кожу интактным мышам с соблюдением асептики. Через несколько дней после трансплантации под кожей у мышей с нарушенными механизмами антибластомной резистентности появляется уплотнение ткани. Спустя 2 недели опухоль достигает больших размеров. Описать состояние животного, общие признаки интоксикация и механизмы антибластомной резистентности.

Опыт 2. Ознакомление с морфологическими характеристиками опухолевых клеток.

Методика: Под микроскопом изучить морфологическую структуру опухолевых клеток.

Зарисовать в протоколах.

Просмотр мультимедийного курса по патологии тканевого роста.

Самостоятельно решить кроссворд. (см. Приложение № 2)

Программированный контроль знаний с использованием тестовых заданий.

Укажите правильный ответ

30. Что такое "опухолевая прогрессия”?

а) качественное и количественное отличие основных биологических

свойств опухолевой ткани от нормальной аутологической, а также от

других патологически изменённых тканей

б) качественные и количественные, генетически закреплённые, передающиеся от клетки к клетке независимо друг от друга изменения свойств опухолевых клеток, обусловливающие нарастание степени злокачественности новообразования

31. Укажите проявления атипизма роста злокачественных

опухолей:

а) метастазирование

б) без рецидивирование

в) инвазивный рост

г) увеличение пролиферативного пула опухолевых клеток

д) торможение или блок созревания клеток

е) ослабление свойства контактного торможения клеток

ж) все ответы верные

32. Верно ли утверждение, что в процессе роста злокачественной опухоли её автономность ослабляется?

а) да

б) нет

ВОПРОСЫ для самоподготовки.

1. Класификация опухолей.

2. Отличия злокачественных и доброкачественных опухолей. Морфофункциональная характеристика опухолевых клеток.

3. Этиология опухолей.

4. Свойства злокачественных опухолей. Понятие об онокогенах.

5. Г ены супрессоры рака и их биохимические функции.

6. Гены, регулирующие апоптоз.

7. Взаимоотношение опухоли и организма.

8. Механизмы противоопухолевой резистентности организма.