<<
>>

Изучение кооперации Т- и В- лимфоцитов

Кооперацию Т- и В- лимфоцитов исследуют in vivo и in vitro. Методы исследования кооперации Т- и В- лимфоцитов in vivo изложены в монографии [Петров Р. В. и соавт., 1981а].

Исследование взаимодействия Т- и В-клеток in vitro включает получение Т-клеток.

Для этого используют метод фильтрования селезеночной суспензии линейных мышей через нейлоновую вату (“Нитрон”) [Ширшев С.В., 1998]. Для выделения В-лимфоцитов применяют реакцию комплементзависимого масс-цитолиза. В качестве цитотоксической сыворотки используют моноклональные антитела против антигенов Т-лимфоцитов мыши. Из суспензии спленоцитов макрофаги удаляют методом негативной селекции, используя их способность прилипать к стеклянной поверхности [Ширшев С.В., 1998]. Жизнеспособность клеток оценивают в тесте с трипановым синим (она должна составлять 90-98%). Инкубируемая по методу J. К. Thomas, Т. Imamura [1986] культура содержит 106 и 5-Ю5 В- и Т-клеток соответственно и 107 эритроцитов барана в 0,15 мл среды Хенкса. Антителообразующие клетки (АОК) подсчитывают в инкубационных камерах через 4 сут [Thomas J. К., Imamura Т. , 1986]. Данный тест отражает синтез IgM В-клетками селезенки при участии Т-хелперов типа 1 (ТЫ-лимфоцитов). Роль Т- и В-лимфоцитов в обеспечение антителопродукции определяют также путем сравнения числа АОК после инкубации той или иной популяции лимфоцитов в течение 1-4 ч с различными концентрациями ТХВ (109- 10 1 М).

2.2.

<< | >>
Источник: Забродский П.Ф., Мандыч В.Г.. Иммунотоксикология ксенобиотиков: Монография. - СВИБХБ, 2007,- 420 с.. 2007

Еще по теме Изучение кооперации Т- и В- лимфоцитов: