Оценка клеточных иммунных реакций Исследование функции Т-лимфоцитов
Исследование функции Т-лимфоцитов проводят по реакции торморжения миграции лейкоцитов (РТМЛ) периферической крови в присутствии конконавалина А (КонА) или фитогемагглютинина (ФГА).
Это один из очень простых, но достаточно информативных тестов. РТМЛ основана на способности сенсибилизированнных Т- лимфоцитов в реакциях с антигеном или митогенами (ФГА, КонА) in vitro выделять биологически активные субстанции - лимфокины, в том числе фактор, ингибирующий миграцию лейкоцитов (один из лимфокинов воспаления) [Фримель X., Брок И., 1986].Для исследования РТМЛ кровь у крыс или мышей забирают из подъязычной вены через 1-6 сут после введения исследуемых ксенобиотиков. В капилляры для определения С-реактивного белка набирают с часового стекла смесь, состоящую из гепаринизированной крови (0,2 мл) исследуемых крыс или мыгцей (опыт и контроль) и раствора КонА (0,5 мл). Концентрация митогена в растворе должна составлять 10-100 мкг/мл. Капилляры запаивают с одного конца парафином и центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин, затем в вертикальном положении их инкубируют 24 ч в термостате при температуре 37 °С. Учет реакции проводят путем измерения длины зоны миграции основной массы лейкоцитов от границы эритроцитарного осадка в контроле и опыте [Гембицкий Е.В. и соавт., 1987]. Величина миграции лейкоцитов обратно пропорциональна активности Т-клеток.