<<
>>

Изучение формирования гиперчувствительности замедленного типа

Для оценки влияния ксенобиотиков на формирование реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) у крыс или мышей используют модель данной реакции, в которой не применяется перенос сингенных иммуноцитов, и адоптивные модели (связанные с переносом клеток; to adopt -принимать, усваивать, присваивать).

ГЗТ оценивают после иммунизации внутривенным введением 2Т08 эритроцитов барана (ЭБ) в 0,5 мл изотонического раствора хлорида натрия одновременно с применением ксенобиотиков. Разрешающую

(вызывающую реакцию) дозу ЭБ (5Т08 в 0,05 мл изотонического раствора хлорида натрия) вводят под апоневроз задней лапы крысы через 4 сут после иммунизации. Оценку реакции осуществляют через 24 ч (можно проводить оценку через 6 - 48 ч) по приросту массы стопы задней лапы крыс по сравнению с контрольной - контрлатеральной [Брюхин Г.В. и соавт.,1990]. Ксенобиотики вводят одновременно с иммунизацией или через 1-4 после нее. Данный тест отражает функцию ТЫ-лимфоцитов и способность их к продукции TGFp ИЛ-3, у-интерферона, ИЛ-12, p-фактора некроза опухоли - лимфотоксина и гранулоцитарно-макрофагального

колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) [Georgiev V.St., Albright

J.E., 1993; Ройт А. и соавт., 2002].

Локальную адоптивную ГЗТ оценивают у линейных крыс- реципиентов (мышей) после введения им под апоневроз стопы смеси ЭБ (5Т08) и спленоцитов (4Т08) от сингенных интактных животных (отрицательный контроль), животных, иммунизированных 108 ЭБ (положительный контроль) и спленоцитов крыс или мышей, получавших ксенобиотик (опытная серия). Селезенку для получения клеток извлекают у доноров через 4 сут после иммунизации. Опытной группе за 1 сут до извлечения селезенки вводят ксенобиотик (опытная серия). Суспензию спленоцитов готовят на среде № 199.

При исследовании формирования ГЗТ у линейных крыс- реципиентов (мышей) после переноса им спленоцитов (5Т08) от иммунизированных 108 ЭБ сингенных доноров, реципиентов через 1 ч сенсибилизируют внутривенным введением 108 ЭБ. Через 4 сут под апоневроз стопы реципиентов вводят разрешающую дозу ЭБ (5Т08) с последующей оценкой реакции через 24 ч. Спленоциты получают через 5 сут после иммунизации доноров. Ксенобиотик вводят реципиентам через 30 мин после иммунизации. В данном эксперименте формирование ГЗТ отражало влияние ксенобиотика на вторичный иммунный ответ в модели адоптивной реакции, связанной с переносом иммунных спленоцитов животным-реципиентам

Исследование формирования ГЗТ у крыс при переносе супрессорных клеток проводят аналогично описанному опыту. Влияние ТХВ на формирование спленоцитов-супрессоров исследуют путем практически одновременного введения токсиканта и ЭБ в толерогенной дозе (вызывающей значительное снижение или полное отсутствие иммунной реакции на антиген) крысам-донорам [Фролов и соавт., 1985; Забродский П.Ф., Мышкина А.К., 1990; Германчук В.Г, 2000].

<< | >>
Источник: Забродский П.Ф., Мандыч В.Г.. Иммунотоксикология ксенобиотиков: Монография. - СВИБХБ, 2007,- 420 с.. 2007

Еще по теме Изучение формирования гиперчувствительности замедленного типа: