Бактерицидная активность сыворотки крови
Бактерицидная активность сыворотки крови является интегральным показателем естественной способности крови к самоочищению от микроорганизмов. Бактерицидное действие сыворотки крови распространяется как на грамположительные, так и на грамотрицательные бактерии.
БАСК зависит от многих неспецифических факторов защиты организма и является одним из параметров, используемых для изучения влияния химических соединений на организм. Данный показатель служит чувствительным тестом для выявления ранних изменений в организме под влиянием химических веществ [Бухарин О. В. и соавт., 1985]. Это доказано и более поздними исследованиями [Забродский П. Ф., 1998].В основе существующих методов определения БАСК лежит оценка индекса ее бактерицидносте, подсчет и изучение морфологии микробных клеток, а также изменение оптической плотности микробной взвеси до и после контакта с сывороткой [Ремезов А. И., Башмаков Г. А., 1976]. Данный показатель является чувствительным тестом для выявления ранних изменений в организме под влиянием токсических веществ [Бухарин О. В. и соавт., 1985]. Зго доказано и более поздними исследованиями [Забродский П. Ф., 1998].
Существуют основания предполагать, что БАСК может определяться пептидными антибиотиками, синтезируемыми организмом животных и человека. Эти антибиотики, действующие на E.coli, Salmonella typhimurium, Streptococcus pyogenes и другие микроорганизмы, открыты и изучены в начале 90-х годов последнего столетия [Вошап H.G., 1995]. Вероятно, ТХВ могут изменять их активность путем прямого или косвенного воздействия.
Бактерицидный эффект сыворотки крови определяют по степени нарастания или угнетения оптической плотности микробносывороточной взвеси в опыте и контроле. В качестве микроорганизмов используется суточная культура Е. coli.
В ускоренном фотонефелометрическом методе определения БАСК по О. В. Бухарину и А. П. Луда (1972) бактерицидный эффект сыворотки крови определяют, используя в качестве микроорганизмов суточную культуру Е. coli. В опытную пробирку с 2,5 мл стерильного бульона Кульбака добавляот 0,5 мл исследуемой нативной сыворотки и 0,1 мл суточной культуры кишечной палочки. В контрольной пробирке вместо сыворотки крови использовался изотонический раствор (0,85%) натрия хлорида (0,5 мл). Расчет БАСК проводили по формуле [Ремезов А.И., Башмаков, 1976].
Определение оптической плотности проводят на фотоэлектроколориметре и спектрофотометре. Следует отметить, что данный метод в экспериметальной иммунотоксикологии используется довольно редко в связи с нестабильностью результатов, обязательная строгая синхронизированность проведения манипуляций в опытных и контрольной пробах).