<<
>>

Комлементарная активность сыворотки крови

Определение активности комплемента проводят гемолитическим методом по Л.С.Резниковой (1967) путем титрования комплемента по

50% гемолизу. Гемолитическую систему готовили из 3% суспензии эритроцитов барана (ЭБ) с добавлением антител к ЭБ путем смешивания раствора ЭБ с сывороткой кролика, иммунизированного эритроцитами барана.

Суспензию ЭБ смешивают с сывороткой в равном объеме. Сыворотку берут в разведении 1:500 от титра, вызывающего гемолиз ЭБ. Гемолитическую систему выдерживают при 37 °С 30 мин для сенсибилизации эритроцитов. Исследуемую нативную сыворотку разводят в 10 раз изототоническим 0,85% раствором натрия хлорида и разливают в 10 пробирок в количестве от 0,05 до 0,5 мл с разницей между объемами 0,05 мл. Сыворотку доводят 1,5 мл изототонического раствора NaCl и во все пробирки добавляют по 1,5 мл сенсибилизированной гемолитической системы. Пробирки инкубируют при 37 °С 45 мин, охлаждали в холодильнике 10 мин, центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10 мин и колориметрируют в фотоэлектрокалориметре в кюветах (3 мм) с зеленым светофильтром против дистиллированной воды. Процент гемолиза вычисляют по формуле [Новикова Л.В. и соавт., 1981].

<< | >>
Источник: Забродский П.Ф., Мандыч В.Г.. Иммунотоксикология ксенобиотиков: Монография. - СВИБХБ, 2007,- 420 с.. 2007

Еще по теме Комлементарная активность сыворотки крови: