2.2.6. ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ГОМЕОСТАЗ, ИММУННЫЙ НАДЗОР, ИММУНОДЕПРЕССИЯ И КАНЦЕРОГЕНЕЗ

Иммунный ответ — это сложный, многоэтапный, последовательный про­цесс, осуществляемый на молекулярном и клеточном уровнях. В организме он начинается с распознавания чужеродных антигенов и заканчивается накопле­нием иммунных эффекторных клеток и антител.

тить внимание на важность прямого контакта между Т-лимфоцитами и анги- геннрсдставляющими клетками, причем основным языком «социального вза­имодействия» между ними служат ситалы распознавания углеводов, 5) лизис трансформированных клеток.

Первым звеном сложною механизма иммунного надзора является естествен­ная резистентность, в которой важная роль принадлежит макрофагам, моно­цитам (циркулирующие макрофаго) и лимфоидным клеткам, не несущим ти­пичных маркеров Т- и В-лимфоцитов и не относящимся к макрофагально- моноцитарным клеткам (0-, ЕК- и К-лимфоциты). Общим отличительным свой­ством этих клеток являются присутствие на их поверхностных мембранах Fc- рецептора и способность оказывать цитотоксическое действие без предвари­тельной сенсибилизации. Сведения, касающиеся идентификации популяций и субпопуляций иммунокомпетентных клеток по поверхностным маркирую­щим структурам, приведены в обзорах В. М. Манько(1987, 1988), Б. Д. Брондза (1991), Т. Kobata и соавт. (1990), М. Imbert 09Q1).

Считают, что естественные клетки-киллеры (ЕК) и К-лимфоциты обуслов­ливают наиболее ранний контроль опухолеобразования, элиминируя любые мутировавшие или неопластически трансформированные клетки. Иными сло­вами, они являются, по-видимому, первыми клетками, атакующими любые измененные клетки в организме.

В настоящее время определены два типа различных лимфоидных клеток, опосредующих нерестриктированную по главному комплексу гистосовмссти- мости (МНС) цитотоксичность против чувствительных клеток-мишеней: не- рестриктированные по МНС цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ) и ЕК-клет- ки [Gantam S. С. et al., 1986; Lanier L. L. et a,., 1986]. Нсрестриктированныс по МНС естественные ЦТЛ, составляющие лишь небольшую популяцию у неиммунизированных животных, распознают мишень через ТЗ(СОЗ)/Ті-анти- ГЄН-рецепторный комплекс («рТ-К.'1СТОЧНЫЙ рецептор), хотя нельзя исключить, что на мишени может присутствовать и второй рецептор. ЕК-клстки, также представляющие небольшой процент лимфоидных клеток, которые опосреду­ют нерестриктированную по МНС цитотоксичность у неиммунизированных хозяев, распознают мишени не через комплекс ТЗ/ТІ, в них нс происходит персіруппировки Т-клеточно-антигенно-рсцепторных генов, и принадлежат они, вероятно, к другому, отличному от Т-лимфоцитов ростку.

Существенно, что ЕК-клетки вовлекаются в широкий спектр иммунных функций, включая медиаторную функцию в противоопухолевой защите, про­дукцию лимфокинов, регуляцию пролиферации гемопоэтических стволовых клеток, резистентность к микробным инфекциям и др. |Sarin A., Saxena R. К., 1989]. Однако наиболее важная функция ЕК-клеток связана с первоначаль­ным ответом, направленным на огторжение неопластически трансформиро­ванных клеток in vivo.

Обнаружена субпопуляция ЦТЛ, способных лизировать in vitro клетки-ми­шени, несущие Fc-реценторы, в присутствии антител против CD3 [Usuba О. et al., 1990]. Такой направленный лизис также нс является рестриктированным ио антигенам МНС и нс требует номинальною распознавания антиіенов ЦТЛ. Эги данные получили подтверждение и в системе in vitro на модели мышиной меланомы.

Помимо этих лимфоидных клеток, существует популяция Т-лимфоцитов, которые также нс требуют сенсибилизации для проявления цитотоксическою действия по отношению к трансформированным клеткам. Особенно эффск-

тивно эти Т-лимфоциты уничтожают быстро размножающиеся несингенные клетки-предшественники: остеобласты, стволовые кроветворные клетки, пред­шественники антителопродуцентов и др. (Петров Р. В. и др., 1981].

Вместе с тем следует обратить внимание на принципиально важный фено­мен, описанный М. Т. Martin (1989). Оказалось, что Т-лимфоциты, проявляя строго выраженную «специфичность» в отношении определенной злокачес­твенной опухоли мышей, могут также лизировать клетки-мишени и других новообразований, к которым они не стимулированы, распознавая их через Т- клеточный гамма-дельта-рсцсптор (ТКР-5) (Jane way С. А., 1990; Lcfranc М. Р., Bonneville М., 1990]. .Механизм этот лизиса пока неясен. Вероятно, исполь­зование методов молекулярной биологии и генной инженерии (для получения цитокинов) в сочетании с МАТ дадут возможность расшифровать молекуляр­ную последовательность и диапазон противоопухолевых эффектов активиро­ванных Т-лимфоцитов.

Очевидно, одновременное лимфоидными клетками, осуществляющими ес­тественную резистентность, или несколько позже (необходимо определенное количество поверхностных TSTA или других опухолсассоциированных анти­генов, функционирующих в качестве трансплантационных, например, сам ретровирус типа С или его структурные белки gp7(), gp85tsE, рЗО и др.) вклю­чаются механизмы специфического противоопухолевого иммунитета.

Необходимо заметить, что во многих работах установлено прямое участие макрофагов в кооперативном ответе Т- и В-лимфоцитов при канцерогенезе. Показано, например, что предшественники Т-киллсров в отсутствие .макро­фатв нс пролиферируют и нс дифференцируются в эффекторные клетки (Igrashi М. et al., 1977]. Без соответствующих монокинов, продуцируемых мак­рофагами, нс происходит дифференцировки В-лимфоцитов в плазматические эффекторные клетки, синтезирующие специфические антитела (Watson D. L.,

1975] . Изменения в лимфоидных клетках под влиянием медиатора могут иметь разные последствия (активация или супрессия) в зависимости не только от природы медиатора, но и физиологического состояния клетки, на которую действует сигнал. Особенно наглядно это проявляется при бластом атозном процессе в течение прогрессивного роста опухоли, когда макрофаги наряду с другими лимфоидными клетками усиливали опухолевый рост и отменяли про­ти воопухолсвое действие Т-лимфоцитов (Gabizon A. ct al., 1980]. Словом, «музыку играют лимфоциты, однако настройку осуществляют макрофаги» (Solbach W. ct al., 1991].

Принципиально новым явилось доказательство участия макрофатв в не­специфическом гомеостатическом контроле над развитием опухоли (Окулов В. Б., Войтснков Б. О., 1990; Суслов А П., 1990; Hibbs J. et al., 1972; Keller R., 1973; Olivotto M. et al., 1974; Mathc G. et al., 1975; Mathe G., Rappaport F. T.

1976] . Причем R. Evans и P. Alexander (1972) выделяют две категории .макро­фатв: 1) вооруженные макрофаги, проявляющие специфическую цитотоксич­ность по отношению к определенным клеткам-мишеням; 2) активированные

макрофаги, которые токсичны для различных клеток-мишеней.

В литературе обсуждаются два механизма опухолецидной активности мак­рофагов: 1) зависимый от ФНО и 2) зависимый от аргинина. Показано, что у- интерферон является основным компонентом фактора, активирующею мак­рофаги | Kiotaki С., 1989].

Итак, активированные макрофаги моїуг вызывать различные, как прямые (в том числе и цитотоксические, являясь существенным звеном естественной резистентности), так и регулирующие эффекты (секретируют в окружающую среду более 100 рахзичных продуктов, втом числе интерлейкин-1, ФНО и др ), а также, как было установлено, играть большую роль в регуляции активности ЕК-клеток при опухолевом росте. Следовательно, макрофаги, являясь цен­тральными эффекторными и регуляторными клетками тканевою гомеостаза, исключительно широко взаимодействуют с нсопластически трансформирован­ными клетками [Окулов В. Б., Войтенков Б. О., 1990; Суслов А. П., 1990; San- toni A. etal., 1980; Rich I. N., 1988; Rappollee D. A., WerbZ., 1989; Oliver A. M., 1990; Cordier G. ct al., 1991; Solbach W. et al., 1991 ].

Проблеме противоопухолевой рсзистсіггности и, в частности, вопросам кле­точной цитотоксичности в последние годы придается первостепенное значе­ние, для их всестороннего обсуждения созывались специальные многочислен­ные симпозиумы и съезды. Накопился огромный фактический материал, пос­вященный расшифровке сложных механизмов деструкции опухолевых клеток, определяемой в тестах противоопухолевой цитотоксичности in vitro и осущес­твляемой разными эффекторами и различными механизмами (Ломакин М. С., Майский И. Н., 1988; Groscurth Р. 1989]. Определена большая группа разно­родных клеток, осуществляющих киллерную функцию в отношении чужерод­ных или собственных опухолевых клеток: макрофаги, ЦТЛ, ЕК-клетки, ес­тественные ЦТЛ, клетки-киллеры, стимулированные лимфокинами или осу­ществляющие киллинг мишеней в присутствии специфических антител, В- лимфоциты с киллерной активностью и др.

На Международном конгрессе в 1982 г. в Швейцарии R. Keller на ос нова­ции механизма действия эффекторов на опухолевые клетки предложил клас­сификацию клеточной цитотоксичности, сгруппированную в три основных типа: 1) индуцированная клеточная цитотоксичность (ИКЦ), эффекторами которой являются ЦТЛ, сенсибилизированные алло- или специфическими антигенами, а также в некоторых случаях и В-лимфоциты, активированные антигенами клетки-мишени; 2) спонтанная клеточная цитотоксичность (СКЦ), осуществляемая главным образом ЕК-клетками, мононуклеарными фагоцитами (МФ), полиморфно-нуклеарными лейкоцитами (ПНЛ) и В-лимфоцитами, 3) антителозависимая клеточная цитотоксичность (АЗКЦ), функцию эффекто­ров которой выполняют К-лимфоциты (К-клстки), а также моно- и полимор­фно-нуклеарные лейкоциты и В-лимфоциты.

ИКЦ является классическим типом клеточной цитотоксичности, она огра­ничена системой собственных антигенов МНС, обладает иммунологической

памятью и является основным эффекторным механизмом трансплантацион­ное и противоопухолевого иммунитета, реакции «трансплантат против хозя­ина» и конфликтной беременности. Система этой цитотоксичности включа­ется прежде всего при распознавании аллогенных антигенов (с целью элими­нации «чужого»), являющихся компонентами МНС. У человека МНС пред­ставлен двумя классами: МНС I (HLA-A, В- и С-антигены) и МНС II ((а-анти- гены; сублокусы D/DR, DQ и DP). Молекулярная биология генов МНС пред­ставлена в обзоре R. S. Accollac и соавт. (1991). В распознавании «чужого» участвуют два главных рецептора ЦТЛ, один из которых узнает «свои» тож­дественные антигены МНС, другой рецептор, связанный с первым, распозна­ет специфические антигенные детерминанты клеток-мишеней (Perlman Р. et al., 1979; Nelson D. L., 1981; Cerottnu J. C., Mac Donald H. R., 1989; Townsend A., Bodmer H., 1989].

Следует обратить внимание на то, что два класса лимфоцитов участвуют в процессах распознавания; В-лимфоциты как предшественники антителооб­разующих клеток и Т-лимфоциты, или тимусзависимыс клетки. В-клсточный рецептор представлен мембранной формой иммуноглобулина (Ig) и связывает антигенные эпитопы на растворимых молекулах или на поверхности частиц. Т-клеточный рецептор распознает антиген на поверхности других клеток как пептидный расщепленный фрагмент антигена и обязательно в ассоциации с молекулами МНС I или II, которые активируют Т-лимфоциты — ссхггветствен- но CD8* или CD4*. Представлены данные, свидетельствующие о том, что вза­имодействие DQoch DQp-цепей определяет аллораспознавание. Считают, что Т-клетки распознают специфические аллоэпитопы как отдельные структур­ные элементы, включающие аллогенный ответ, или как контактные элемен­ты, связывающие чужеродные пептиды. Предполагают, что Т-клетки распоз­нают только DQ-гетеродимер или пептидный антиген, связанный с DQ-гетс- родимером. Лимфоциты также экспрессируют адгезивные рецепторы, регули­рующие их миграцию и взаимодействие в иммунных реакциях (De Baetselier Р., 1990; Mickelson Е. М. et al., 1991].

G. Miiller и соавт. (1991) представили данные, свидетельствующие о том, что Ig-рецепторы на поверхности В-клеток обладают свойством связывать антиген и концентрировать его на специфических В-клстках, создавая усло­вия для воздействия активационных сигналов, происходящих оттимусзависи- мых антиіенов. На ранних стадиях дифференцировки прс-В-клеток важную роль иірают интерлейкин-7, продуцируемый стромальными клетками, а так­же онкоген abl. Взаимодействие пре-В-клеток со стромальными клетками опосредовано двумя системами адгезии: VLA-4/V-CAM-1 и СО44/гиалурони- дат. Без стромальных клеток на интерлейкин-7 отвечают только пре-В-клетки с функционально перестроенными генами тяжелой цепи Ig. Перестройка ге­нов Ig индуцируется целым рядом еще плохо изученных факторов, среди ко­торых особое место отводится продуктам генов RAG-1 и RAG-2 (гены актива­ции рекомбинации). Молекулы Ig транспортируются на цитоплазматическую мембрану в комплексе с продуктами генов mb-1 или B29[DeFranco A. L., 1991].

Связывание чужеродного антигена через Ig-рсцептор ведет к их внутрик­леточному перемещению и инициации процессов переработки антигена. В- клетки, нагруженные Ig-рецепторам и, обладают способностью представлять антиген для Т-лимфоцитов. После воздействия пептидных фрагментов на кле­точную мембрану и взаимодействия их с молекулами МНС II происходит тран­сформация В-клеток в эффекторные антигенпредставляющие клетки, способ­

ные к кооперации с Т-хелперами и их активации. Очевидно, связывание по­верхностного Ig со специфическим антигеном подготавливает В-клстки к ад­гезивному контакту с Т-клстками Действительно, это было продемонстриро­вано L. Н. Dang и R L. Rock (1991). Оказалось, что стимулирование В-лим­фоцитов через поверхностные lg-рецспторы индуцирует адгезию, зависимую от молекул LFA-1 и ICAM-1, причем независимо от прямых влияний на Т- чли В-клстки или от их физического взаимодействия с образованием клеточ­ных кластеров. Предложена модель участия адгезионных, вспомогательных мо­лекул в обеспечении В-клеток сигналами в течение взаимодействия с Т-хел­перами [Owens Т., 1991).

Считают, что молекулы Ig при связывании с антигеном выполняют две раз­личные функции — регуляторную и эффекторную (защитную). В первом случае Ig функционирует как В-клеточный рецептор для антигена, передающий клетке специфический сигнал. Во втором случае Ig секретируется в раствор, где сю вза­имодействие с антигеном стимулирует эффекторную активность, приводящую к разрушению антигена и его выведению из организма (комплсмснтзависимый ли­зис, фагоцитоз и др ). R. Е. Langman и М. Cohn (1991) приводят аргументы, дока­зывающие, что эти две функции опосредуются двумя различными механизмами. Авторы утверждают, что регуляторное действие Ig-рецептора опосредуется инду­цированным антигеном конформационным изменением молекулы Ig, тогда как защитные реакции опосредуются антигснзависимой агрегацией Ig. Отрицается возможность передачи специфического сигнала антигенорсактивной клетке пу­тем агрегации (перекреслюй сшивки) поверхностных рецепторов антигена. Та­кая агрегация может имитироваться рахчичными реагентами, связывающими Ig, поскольку это означало бы, что молекула Ig имеет множество активных центров («липкий конец»), а это противоречит имеющимся данным и неприемлемое те­оретической точки зрения. Постулируется, что для передачи сигнала клетке зре- буегся лишь одна ZH-субъединица Ig, которая содержит лишь один функциональ­ный антиген, связывающий участок. Эю возможно только при условии, что пере­дача сигнала зависит от конформации молекулы Ig. Напротив, для осуществле­ния защитной функции, связанной с образованием агрегатов, необходимо при­сутствие нескольких антигенсвязывающих участков на молекуле Ig. Этим, со­бственно, и объясняется елруклура молекулы Ig, состоящая из двух и более пар ZH, каждая из которых содержит один активный центр. Один и тот же уникаль­ный антигсневязывающий участок используется как для передачи сигнала на уров­не В-клсточного рецептора антигена, так и для эффекторною действия секрети­руемого Ig.

Ответ В-лимфоцитов (развитие иммунною ответа или толерантности) за­висит от формы контактирующею антигена и уровня их дифференцировки. Эта двунаправленность ответа была четко показана в экспериментах Р. Van Endert и G. Moldenhaur (1991). Повышение уровня внутриклеточноп) Са²* пода­вляет, а увеличение активности протеинкиназы С стимулирует пролиферацию В-лимфоцитов.

Исследована роль р₂-микроглобулина в процессах рестрикции (ограниче­ния) представления антигена. Оказалось, что антигены, распознаваемые ЦТЛ как пептиды, представляющие гетеродимеры тяжелых цепей, нековалентно связаны с Р₂-микроглобул и ном [Рёгатап В. et al., 1990]. Высокополиморфная «природа» тяжелых цепей и как следствие их способность представлять раз­личные наборы пептидов обеспечивают иммунный ответ на большинство па­тогенов. В то же время полиморфизм р₂-микроглобулина ограничен, что обус­

ловливает только структурные функции, в частности, правильный подбор мо­лекул МНС класса I и их транспорт к поверхности клетки. Экспериментально показано участие (3₂-микрогл обул ина в селекции пептидов, связанных с моле­кулами МНС I.

Итак, генетический контроль экспрессии специфически сенсибилизиро­ванных ЦТЛ существенно отличается от механизма генетическою контроля продукции антител. Кроме тою, следует особо подчеркнуть наличие двойной специфичности ЦТЛ, суть которой сводится к распознаванию «чужою» толь­ко в сочетании с антигенами МНС клетки-мишени. Причем ЦТЛ не лизируют клетки-мишени, нс совпадающие с ними по определенным антигенам МНС, т. е. этот процесс характеризуется аллогенной рестрикцией. При этом важно заметить, что взаимодействие ЦТЛ и клеток-мишеней сначала происходит без специфическою распознавания антигенов и предшествует последующему вза­имодействию Т-клеточного рецептора (ТКР) со специфическим антигеном IDe Vries J. Е. ct al., 1989]. Антигсннсзависимая адгезия осуществляется двумя различными путями. Первый — это взаимодействие CD2 (рецептор для барань­их эритроцитов, филогенетически наиболее древний) с LFA-3 на клетке-ми­шени, а второй — взаимодействие LFA-1 с ICAM-1. Предполагают, что такая антигеннезависимая адгезия существенна для активации Т-лимфоцитов через участие ТКР.

Активация протеинкиназы С усиливает адгезию, опосредованную LFA-1, но не С02-молекулой, а цАМФ снижает LFA-1-опосредованную адгезию, не влияя на взаимодействие CD2-LFA-3 (Moingeon Р. Е. et al., 1991J. Положи­тельная регуляция LFA-1-пути происходит в отсутствие какою-либо повер­хностного перераспределения этих молекул, что может свидетельствовать о формировании высокоаффинных ICAM-1-связывающих молекул. Независи­мая от ТКР СП2-опосрсдуемая адгезивная функция предполагает важную роль СЭ2-пути в инициации межклеточных взаимодействий до вовлечения ТКР и взаимодействия между LFA-1 и ICAM-1 молекулами, а также подчеркивает комплементарную природу CD2 и LFA-1-опосредуемых путей адгезии в тече­ние иммунною ответа.

В дальнейшем распознавание антигенов Т-лимфоцитами осуществляется посредством тримолекулярною комплекса, состоящею изТКР, молекулы МНС и пептидного фрагмента (длина около 20 аминокислотных остатков) антигена, который обычно располагается во впадине между двумя а-спирадями молеку­лы МНС (Kumar V. et al., 1989]. Основным условием, определяющим способ­ность клеток представлять антиген для контакта с распознающими Т-лимфо­цитами является экспрессия на их поверхности Іа-молекуд. Такой конъюгиро­ванный с la-молекулой антиген взаимодействуете Т-рсцептором CD3(T3), ко­торый присутствует на клеточной мембране ЦТЛ и представляет собой ком­плекс из трех мономерных пептидов (ММ 25 ООО, 20 000 и 20 (XX)). В общей сложности ТКР состоит из двух вариабельных цепей а(5 и четырех констант­ных цепей: у, б, є и £, вместе называемые CD3 (Rubin В. et al., 1991 ]. Считают, что ТЗ-комплекс выполняет функцию как бы спусковою механизма в Т*кле­точной активации (Mcuer S. С. ct al., 1982; Nabavi N. ct al., 1989]. Этот гли­копротеид ассоциирован с другим гликопротеидом (Ті-антигеном), представляю­щим собой соединенный S-S-связью гетсродимер с молекулярной массой 80 (XX)—90 (XX). Ею молекула состоит из двух вариабельных полипегпидных це­пей (a-цепь, ММ 45 (XX); [5-цепь, ММ 37 (XX)—45 000). Ті-антигсн является ре­цептором, распознающим специфический антиген, т. с. отвечает за антигенную .12-173

специфичность. Комплекс Іа-Ті/ТЗ запускает целый ряд процессов, приводящих к активации Т-лимфоцитов и завершающихся индукцией иммунною ответа. В присутствии форболмиристатацетата МАТ против Ті- или СЭЗ-антигенов инду­цируют выработку Т-лимфоцитами интерлейкина-2 (ИЛ-2) и стимулируют про­лиферацию клеток. Иными словами, пролиферативный процесс связан с синте­зом ИЛ-2 и экспрессией его рецеигора. Взаимодейсгвие рецептор — лиганд ин­дуцирует гидролиз фосфотидилинозитола и приводит к активации протеинкина­зы С, т. е. рецептор ИЛ-2 с молекулярной массой 75 (XX) передает сигнал для акти­вации тирозин протеинкиназы [Salttman Е. М. et al., 1989).

Отмечается, что регуляция функции комплекса Т-клеточный рецептор — ТЗ может осуществляться посредством протеинкиназы С, причем в этом взаимо­действии может участвовать и комплекс CD4/CD8 |Rudd С. Е., 1990). Обнару­жено, что CD4- и CDS-молекулы кур взаимодействуют с клеточной тирозин- протеинкиназой, гомологичной р56^1ек млекопитающих |Veillettc A., Ratcliffe М. J., 1991J. Связывание CD4 или CD8 с соответствующими лигандами ассо­циировано с быстрым сигналом фосфорилирования внутриклеточного тиро­зина. Полагают, что функция этих поверхностных молекул может опосредо­ваться через изменения ассоциированной тирозинпротсинкиназы. Таким об­разом, ассоциация CD4 и CD8 с внутриклеточной тирозинпротсинкиназой эволюционно консервативна, что подтверждает представление о важной фун­кции этих молекул при осуществлении иммунологическою ответа. Отмечено, что тирозинпротеинкиназа p56^kk реагирует с CD4 или С08-мо^іекулами. Этот фермент не имеет экстраклеточных доменов, однако связан с цитоплазмати­ческой мембраной, фосфорилирует белки по остаткам тирозина и входит в состав рецепторов для ФР. Активация р56^1ек приводит к ингибиции функции СЭЗ-молекулы (Gallagher R. В., Cambier J. С., 1990). Активность p56^kk в свою очередь регулируется СЭ45-молскулой. Противоположное влияние оказывает активация другой тирозинкиназы p56^fyn, при гиперактивности которой усили­вается активация Т-клсток через CD3. Кстати, некоторые исследователи счи­тают, что тирозинкиназа p56^fyn играет ключевую роль при активации продук­ции ИЛ-2 через Т-клеточный рецептор.

Обработка Т-лимфоцитов форболовым эфиром приводит к фосфорилиро­ванию у- и 5-цепей ТЗ и интернализации коміискса. Покоящиеся Т-клстки конститутивно экспрессируют мРНК (5-цепи (Frank S. et al., 1990; Moire N. et al., 1990; Vivier E. et al., 1991). Уровень этою транскрипта сохраняется ста­бильно по крайней мере на начальном этапе стимуляции Т-клеток. Полагают, что изолированные (3-цспи, конститутивно экспрессируемые CD8* Т-клетка- ми, в первую очередь ответственны за изначальное взаимодействие ИЛ-2 с этими клетками. Такое взаимодействие приводит к образованию высокоаффинных рецепторов ИЛ-2 и к запуску клеточной пролиферации при одновременной стимуляции Т-клсток через СЭЗ-молекулу. В то же время нельзя исключить, что экспрессия и фосфорилирование тирозина ^-субъединицы ТКР в тимоци­тах человека функционально связаны с рецепторами, передающими сигнал активации. Причем цитоплазматический конец цепи создаст условия для этой передачи от комплекса антиген/МНС, связанною с арТКР.

Установлено, что комплекс Ті/ТЗ главным образом обеспечивает функци­ональную активность ЦТЛ, в частности, участвует в клональном росте антиге­носпецифических Т-лимфоцитов. Антисыворотка против ТЗ-антигена инги­бирует ответ Т-лимфоцитов на специфический антиген |MeuerS. С. etal., 1982; Stromingcr J. L. 1989; Rudd С. E., 1990; Africa G. F. et al., 1991). Показано так­

же, что ТКР ТЗ участвует в проявлении цитолитичсской активности Т-лимфо­цитов: его инактивация нарушает постадгезионную стадию цитолиза [Oettgen Н. С., Terhost С., 1987 J. Анализ структуры ТКР выявил, что район CDR3 опре­деляет тонкую специфичность ТКР [Wither J. ct al., 1991). Помимо комплекса Ті/ТЗ (ар-клеточный рецептор), играющего основную роль в обеспечении контактного межклеточного взаимодействия Т-лимфоцитов и аіггигеннредстав- ляющих клеток, в взаимодействиях Т — В, Т — Т, а также Т-киллеров с клет­ками-мишенями принимают участие и другие молекулы клеточной мембраны Т-лимфоцитов: LFA-l, LFA-2, LFA-3, CD4, CD8 уб-комплексный ТКР, моле­кула CD16, распознающая Fc-часть IgG и запускающая литическую активность. Наличие этих рецепторных молекул на клетках-мишенях, с которыми могут взаимодействовать клетки-эффекторы и цитотоксические молекулы (цитоки­ны и медиаторы), продуцируемые и секретируемые ими, является непремен­ным условием цитолиза (киллинга) и элиминации из организма опухолевых, инфицированных вирусами и генетически измененных клеток. Существенно, что в некоторых случаях углеводные структуры (рецепторы пектинового типа) служат мишенями как для Т-лимфоцитов и ЕК-клсток, так и для цитотокси­ческих антител, синтезированных В-лимфоцитами |Werkmeister J. A. et al., 1985;Nose М. etal., 1987].

Разнообразие ТКР Т-клеток обусловливается комбинаторикой эмбриональ­ных генных сегментов, неточностями процесса объединения сегментов и ком­бинаторикой ассоциации а- и [3-цепей в гстеродимсрс. Разнообразие ограни­чивается положительной и отрицательной клональной селекцией Т-клеток в тимусе. Распознавание Т-клстками собственных антигенов может быть обус­ловлено аберрантной экспрессией молекул МНС, отклонениями в процессинге антигенов, а также нарушениями антиидиотипической или супрессорной ре­фляции. На различных многочисленных экспериментальных системах пока­заны резкое оіраничснис использования V-сегментов цепей ТКР компетен­тными Т-клетками, а также различия в использовании таких сегментов у жи­вотных разных линий [Kumor V. ct al., 1989].

Установлено, что для генерации зрелых тимоцитов необходимо специфи­ческое взаимодействие двух известных в настоящее время Т-клеточных рецеп­торов (ар и у5) с антигенами МНС [De Libero G., Lanzavecchia A., 1988; Scott B. ct al., 1988]. Причем при этом важное значение имеют как тип взаимодейст­вия ТКР/МНС, так и CD4 или CD8/MHC, т. е. второй механизм положитель­ной (или отрицательной) селекции и отклонения репертуара в сторону диф­ференцировки CD4*8 или CD4 8* незрелых тимоцитов |Zuniga-Pflucker J. С., 1989; Punt J., Hashimoto Y., 1991]. Предполагают, что сигналом для диффе­ренцировки СО4*8*-тимоцитов в популяции CD4*8’ или CD4 8* Т-клсток слу­жит одновременное связывание ТКР двойных позитивных тимоцитов с ком­плексом МНС/пептид и с молекулами CD4 или CD8. Получены данные, сви­детельствующие о том, что перекрестное связывание молекулы CD4 может приводить к активации Т-клеток в отсутствие коэкспрсссии молекулярных комплексов CD3/TKP и, кроме того, молекула CD4 может проводить позитив­ный сигнал у клеток миелоидного ряда фенотипа CD4 [Carrel S. et al., 1991 ].

С помощью клонирования Т-лимфоцитов показано, что цитотоксичность ЦТЛ обеспечивается разными клонами Т-лимфоцитов, несущими на Повер­хности мембран различные маркеры: ТЗ и Т4 на Т4-клонах и ТЗ и Т8 на Т8- клонах [Черсдесв А. Н., Ковальчук Л. В., 1989; Platsoucas С. D., 1984; Kanof М. Е. et al., 1987]. Молекула Т4 (CD4) является маркером Т-хелперов и пред- 12*

ставляст собой гликопротсид клеточной мембраны с молекулярной массой около 60 ООО. Этот мембранный мономерный белок состоит из 4 внеклеточ­ных доменов (аналогично иммуноглобулинам), трансмембранною участка и короткого цитоплазматическою фрагмента. В транс-положении молекула вза­имодействует с молекулами МНС класса II и, помимо стабилизации комплек­са Т-рецепторов с МНС, способна проводить поступающие на Т-лимфоциты сигналы внутрь клетки за счет ассоциации с тирозинкиназой р56 и/или после взаимодействия с Т-рецепторами. Выполняя самые разнообразные физиоло- гические функции, молекула CD4, кроме тою, служит главным рецепторным участком клетки для HIV [Fleur S. D. et al., 1992J. Рецептор Т4-лимфоцитов рсіулируст и потенцирует их активацию через комплекс Ті/ТЗ, лигандом для CD4 является полиморфная область Ia-молскулы. Маркер Т-супрессоров мо­лекула ТХ (CD8) — гликопротеид с молекулярной массой около 70 (XX), так же как и молекула CD4, является рецептором, потенцирующим активацию Т- лимфоцитов через комплекс Ti/T3-(CD3). Считают, что молекула CD8 фун­кционирует не только как структура, способствующая адгезии, но и как струк­тура, участвующая в запуске процесса лизиса [Blanchard D. et al., 1987; Saizawa

К. el al., 1987; Coffman R. L., Mosmann T. R., 1991]. Лиганд, активирующий триггерную функцию рецептора CD8, выявлен частично.

Показано, что отдельные клоны Т4 ЦТЛ лизируют клетки-мишени, несу­щие на поверхностных мембранах антигены МНС класса I, а некоторые кло­ны Т-лимфоцитов фенотипа Т8 разрушают клетки-мишени, содержащие ан­тигены МНС класса II. Следовательно, эти клоны ЦТЛ могут, естественно, вызывать деструкцию и опухолевых клеток-мишеней, содержащих, с одной стороны, антигены МНС (причем антигены МНС класса I играют при этом ключевую роль в киллерном эффекте ЦТЛ, а с другой — опухолеассоцииро­ванные антигены трансплантационного типа. G. Woods и соавт. (1989) пред­ставили доказательства, свидетельствующие о существенной роли Т4 ЦТЛ в противоопухолевом иммунитете, поскольку они лизировали разные типы опу­холевых клеток, в том числе и некоторые аитигенотрицательные.

В свою очередь получены данные, согласно которым для отторжения опу­холевых клеток, экспрессирующих необычные антигены МНС I, необходимы только Т8 ЦТЛ, для индукции которых не требуются CD4* Т-хслпсры [Fan S. Т., Edgington Т. S., 1989].

Что касается деталей механизма киллерного эффекта В-лимфоцитов в ин­дуцированной клеточной цитотоксичности, то они пока неизвестны. Счита­ют, что В-лимфоциты, экспрессирующие 1а-антигсны, активируются антиге­нами клетки-мишени и продуцируют соответствующие цитокины и антитела, направленные против этих клеток (опухолевых или инфицированных вируса­ми). Затем в процесс лизиса вовлекается рецепторный комплекс Ті/ТЗ акти­вированных той же клеткой-мишенью Т-лимфоцитов, которые также прини­мают участие в киллинге этих же клеток-мишеней [Rodriguez М. et al., 1986]. Помимо этих общих антигенов, стимулирующих В- и Т-лимфоциты, В-лим­фоциты могут распознавать и другой антиген, против которот они также син­тезируют цитотоксические антитела.

Было сообщено об обнаружении N-гликозилированных трансмембранных фосфопротсидов, которые у В-клеток служат возможными аналогами CD3- молскул Т-лимфоцитов [Gallagher R. В., Cambier J. С., 1990]. Проанализиро­ваны значение антигена CD20 (В 1, фосфопротсид с ММ 33 ООО) в активации В-лимфоцитов, роль перекрестной сшивки поверхностных Ig при активации

В-клеток и участие в этом процессе раннего гена ростовой реакции (Egr-1). Оказалось, что у опухолевых клеток промотор Egr-1 ингибирован и нс инду­цируется после сшивки Ig-рсцспторов, в результате чего клетка погибает.

Следует отметить, что достаточно полно охарактеризованы растворимые факторы иммунной системы, регулирующие активацию, пролиферацию и диф­ференцировку В-лимфоцитов человека. В первую очередь к ним относятся ИЛ- 1—7, интерфероны а, Р и у, а и (3-ФНО, р-ТФР, поверхностный антиген CD23, низкомолекулярный фактор роста В-клеток (Steel С. М., Hutchins D., 1989; Amigorena S. et al., 1990; Dc Groot C. et al., 1990; Joshi P. C., Choi Y. S., 1991 ]. He полностью охарактеризованы высокомолекулярный ФР В-клеток и фак­тор, активирующий В-клетки. Важную роль в функциональной активности В- клеток играют поверхностные детерминанты (CD23, CD40, CD 19, CD20, CD21, CD22), адгезивные молекулы (LFA-1, CD45), молекулы МНС классов I и И. Трансформирующее участие в В-клеточном ряду принимают протоонкогены.

Исследована регуляция реактивности В-клсток чсловскаТК-клстками CD45 А* и CD45 A' [Hirohata S., 1991 ]. Для этого была изучена система, в которой активированные airni-CD3-MАТТ-клетки индуцировали секрецию Ig В-клет­кам и в отсутствие вспомогательных клеток. Оба тина Т8-клеток, но CD45 А* более эффективно, супрсссировали эффекторную функцию Т-клеток относи­тельно В-клеток. Супрессия, как считают, опосредовалась секрецией скорее ИЛ—2, чем у-интерферона.

Взаимодействие различных лимфокинов обусловливает оптимальное раз­витие В-клсточного ответа, а нарушение в системе лимфокинов, наоборот, может способствовать патогенезу аутоиммунных бластом атозных и других за­болеваний. Необходимо обратить особое внимание на каскадный принцип взаимодействия различных цитокинов. Человеческий ИЛ—4, в основном сек­ретируемый активированными Т-клстками, в этом отношении может служить наглядным примером. ИЛ—4 обладает плейотропным действием на Т- и В- клетки, моноциты, полиморфно-нуклеарные лейкоциты, фибробласты и эн­дотелиальные клетки. ИЛ—4 действует на различных стадиях клеточной диф­ференцировки, и эффекты его влияния зависят от участия других цитокинов. Например, ИЛ—4 блокирует некоторые эффекты действия ИЛ—2, тогда как у-интерферон блокирует некоторые эффекты ИЛ—4. ИЛ—4 играет существен­ную роль в индукции продукции IgE. Показана противоопухолевая и противо­воспалительная активность ИЛ—4 [Banchcreau J. ct al., 1991].

Уточнена регуляторная роль цитокинов Т-клеточного происхождения в ак­тивации и дифференцировке В-клеток. Оказалось, что Т-хелперы типа 1 (ТН- 1), продуцирующие ИЛ—2, у-интерферон и лимфотоксин, моїуг как способ­ствовать проявлению В-клеточной функции, так и ингибировать ее [Tartako- vsky В. ct al., 1990; Champoux S., Lenoble M., 1991; MosmannT. R., 1991]. В то же время Т-хелперы типа 2 (ТН—2), продуцирующие ИЛ—4, ИЛ—5, ИЛ—6, Р600 и ИЛ—10, только активировали продукцию Ig В-лимфоцитами. Опреде­ленное регуляторнім; влияние на В-клетки и различные типы гемопоэтичес­ких клеток оказывали и другие фенотипы Т-хелперов, которые можно сгруп­пировать по степени зрелости клеток: 1) нскоммитированные, 2) кратковре­менно стимулированные, 3) хронически стимулированные и 4) клетки долгов­ременной памяти. Отмечены регуляторные взаимодействия между всеми эти­ми субпопуляциями Т-хелперов. Например, продукт ТН-l-клеток у-интерфе- рон ингибирует рост ТН-2-клеток, а секретируемый ТН-2-клетками ИЛ-10 угнетает функцию ТН-1-клеток. Гетерогенность Т-хелперов выявлена нс только

у мышей, но и у человека и крыс, хотя имеются значительные различия в при­роде субпопуляций Т-хелперов (Coffmann R. L , Mosmann Т. R., 1991 ]. Уста­новлено, что для максимальной В-клсточной активации необходимо прямое взаимодействие Т-хелперов и В-клеток. Оно зависит от экспрессии 1а-моле- кул на В-клетках и L3T4 — на Т-клетках (Kubota Е. et al., 1991 J.

Показано, что В-лимфоциты, активированные Staphylococcus aureus Cow­an (Вс), лизируют клетки сарком WEH1-164 мышей, сенсибилизированные ак­тиномицином D (Bersani L. et al., 1987]. В этом активированном типе клеточ­ной цитотоксичности (АКЦ) цитолиз вызывают нс антитела, а лимфотоксин (лимфокинподобные медиаторы). К таким медиаторам относится и естествен­ный активирующий фактор (Natural activating factor, NAF), стимулирующий СКЦ. Установлено, что В-лимфоциты синтезируют этот фактор более интен­сивно, чем Т-клетки (Koide Y., Takasugi M., 1980]. Очевидно, стимулируя СКЦ, этот фактор одновременно и опосредованно участвует и в лизисе клеток-ми­шеней.

Таким образом, В-лимфоциты могут осуществлять киллерные функции в сложном и комплексном процессе цитолиза клеток-мишеней в различных типах клеточной цитотоксичности (ИКЦ, АКЦ и СКЦ) за счет продукции много­численных медиаторов, обладающих цитотоксическими (цитостатическими) свойствами, а также синтеза различных типов цитотоксических антител. При­чем указанные медиаторы могут действовать как непосредственно на клетки- мишени, так и опосредованно, стимулируя какую-либо клеточную цитоток­сичность.

Известно, что некоторые опухолевые клетки утрачивают антигены МНС и в то же время содержат слабые (или в недостаточном количестве) TSTA-анти­гены (Stutman О., 1982]. В этих случаях лизирующее действие на трансформи­рованные клетки главным образом оказывают естественные киллеры, являющиеся, как уже отмечалось, эффекторными клетками спонтанной клеточной цитотоксичности — основного ме­ханизма иммунологического надзора.

Естественная невосприимчивость вообще и к неопласти­чески трансформированным клеткам в частности определяется суммой врож­денных неспсцифических защитных механизмов, среди которых центральное место занимает функция лимфоидных клеток, не несущих типичных марке­ров Т- и В-клеток. Первые сообщения о таких клетках, обладающих способ­ностью оказывать цитотоксическое действие без предварительной специфи­ческой стимуляции (сенсибилизации), появились в начале 70-х годов. S. S. Froland и J. В. Natvig (1973) обнаружили в периферической крови чело­века 14,5% лимфоцитов, не имеющих типичных маркеров Т- и В-клеток и обладающих комплсмснтнсзависимой цитотоксичностью по отношению к клеткам-мишеням, покрытым специфическими антителами. Эти лимфоидные клетки были названы Р. Greenberg (1973) 0-лимфоцитами. Затем были охарак­теризованы L- и К-лимфоциты, обладающие подобными свойствами (MacLcn- nan J. С., 1974; Horwitz D. A., Lobo P. I., 1975]. И наконец, были описаны ес­тественные (или нормальные) лимфоидные клетки-киллеры (NK-клетки, от англ, natural killer cells), также лишенные мембранных рецепторов Т- и В-кле­ток, но в отличие от К-лимфоцитов NK-клстки могут проявлять цитотоксич­ность и в отсутствие специфических антител (Cooper S. М. et al., 1977; Trinch- ieriG. etal., 1977; Welsh R. 1978]. Считают, что ранние тимоцитыСО7*, CD45*. CD1 * 2 3'4’8’ могут дифференцироваться под влиянием микроокружения тиму­

са в о(3- и у&-Т-лимфоциты или NK-клетки [De la Hera А., 1988J. В данном разделе будут в основном приведены сведения о роли лимфоидных клеток, нс имеющих типичных маркеров Т- и В-лимфоцитов, в противоопухолевой ре­зистентности. Более подробные характеристики этих клеток можно найти в обзорах Б. Т. Билынского, Я. В. Шпарыка (1980, 1991), Р. В. Петрова и соавт. (1980), Р. М. Хаитова, А. В. Маджидова (1984), В. М. Манько, Р. М. Хаитова (1987), J. Hackett ct al. (1986), В. Perussia, G. Trinchieri (1988) и J. Riz (1989).

0-лимфоциты представляют собой популяцию медленно делящихся лим­фоидных клеток, отличных от эритроидных, гранулоцитарных и моноцитар- ных клеточных линий, которые не обладают фагоцитарной активностью и не прилипают к стеклу [StoboJ. D.etal., 1973; Parish С. R., 1975]. Получены фак­ты, свидетельствующие о том, что среди 0-лимфоцитов имеются предшествен­ники как Т-, так и В-лимфоцитов [Chiao J. W. et al., 1978; Hokland P. et al., 1978; Kaplan J., 1978]. Предполагают, что В-лимфоциты костного мозга про­исходят из 0-лимфоцитов. Вместе с тем В-клетки периферических лимфоид­ных органов отличаются от 0-лимфоцитов тем, что последние нс содержат на мембране С_}-рсцсптор (или же плотность этого рецептора очень низкая), име­ют на поверхности легкие (вместо тяжелых) цепи Ig и различаются по ответу на линополисахарид. Высказываются предположения, что часть популяции б- лимфоцитов является незрелой формой В-лимфоцитов, несущих на мембране Fc-рецепторы на ранней стадии дифференцировки, но не имеющих Ig и обла­дающих антителозависимой цитотоксической активностью [Haegert D. J., 1978]. На промежуточной стадии дифференцировки такие клетки содержат на мембране Ig и также обладают антителозависимой цитотоксичностью. На последней стадии созревания эти В-лимфоциты сохраняют Ig, но утрачивают антитслозависимую цитотоксическую активность. Правда, наряду с этим нс исключается возможность дифференцировки 0-лимфоцитов в субпопуляцию В-лимфоцитов, для которых характерны высокая антителозависимая цитоток­сичность и присутствие на мембранах [g-детерминант высокой плотности [Brier А. М. ct al., 1975].

Установлено, что 0-лимфоциты человека сшгтсзируют нерастворимый мак- ром ол скул ярный холодовой глобулин с молекулярной массой 185 ООО, по фи­зическим свойствам сходный с таким же белком Т-клсток, однако отличаю­щийся от него по антигенным свойствам. S. Р. Hauptman и соавт. (1979) счита­ют, что этот обнаруженный ими глобулин является новым маркером 0-лимфо- цитов человека>

Таким образом, популяция 0-лимфоцитов неод эродна, а функции их весьма разнообразны. Эти лимфоидные клетки отвечают на антигенную и митоген­ную стимуляцию, выполняют функции отвечающих субпопуляций в смешан­ной культуре, а часть из них представляет собой эффекторные клетки в анти­телозависимой цитотоксичности [Caraux J. ct al., 1978; Hokland P. et al., 1978]. Кроме тою, установлено, что 5% периферических 0-лимфоцитов крови чело­века обладают как антитслозависимой, так и естественной киллерной актив­ностью [Ozer Н. et al., 1979]. Эта популяция 0-лимфоцитов не содержит на мембране Ig, Іа-подобного антигена и рецептора для эритроцитов барана. По­лучены данные, указывающие на то, что клетки, опосредующие естественную и антителозависимую цитотоксичность, не экспрессируют на мембране анти­ген HLA-DRm, вероятно, нс относятся к В-лимфоцитам (Ng Ah-Kaketal., 1980].

В периферической крови человека выявлено около 20% L-лимфоцитов (la­bile receptor — лабильный рецептор), также нс несущих типичных маркеров

Т- и В-клеток [Horwitz D. A., Lobo Р. I., 19751. Дія этой популяции характер­но присутствие на мембране высокоавидных трипсинрезистснтных Fc-рецеп­торов для связывания IgG нормальной сыворотки человека и морской свинки при 4° С. При повышении температуры до 37° С L-клетки теряют рецептор (освобождение в среду), отсюда и возникло название «L-лимфоциты».

Предполагают, что L-клетки представляют собой самостоятельную гемо­поэтическую линию, которая занимает промежуточное положение между лим­фоцитами и моноцитами, поскольку по особенностям строения ядра они сход­ны с моноцитами, а по электронно-микроскопической характеристике близ­ки к лимфоцитам [Horwitz D. A., Lobo Р. I., 1977; Horwitz D. A. et al., 1978). Выделяют две субпопуляции L-лимфоцитов: первая характеризуется низкой плотностью їа-антигена на мембране Fc*Ia*M‘, вторая содержит миелоидный М-антигсн, обнаруживаемый антимиелоидной сывороткой Fc*Ia М*. Всегда выявляется небольшое число L-клеток, несущих оба антигена Fc*Ia*M*. L-лим­фоциты обладают выраженной антителозависимой клеточной цитотоксичес­кой активностью, которая, вероятно, играет определенную роль в противоопу­холевом иммунитете.

По функциональной активности и поверхностным антигенным маркерам ЕК-клстки подразделяются на три основные популяции: 1) NK — естественные киллеры, вызывающие лизис in vitro неопластических клеток гсмопоэтичсс-? кого происхождения, а также клеток, инфицированных вирусами; 2) NC (nat-' ural cytotoxic) — естественные цитотоксические, лизирующие клетки солид­ных опухолей; 3)NCs (natural cytostatic) — естественные цитостатические клет­ки, блокирующие синтетические процессы в клетках-мишенях [Ehrlich R. et al., 1980; Stem P. et al., 1980; Stutman O., 1982].

Получены данные, указывающие на то, что взаимодействия между ЕК-лим- фоцитами и клетками-мишенями, зараженными вирусами, в том числе и опу­холеродными, чрезвычайно сложны. В каждом конкретном случае они зави­сят от природы клеток-мишеней и вируса, а также от степени инфицирования [Welsh R. М., Hallenbeck I., 1980]. Показано, что активность ЕК-лимфоцитов в селезенке мышей — носителей опухолей снижена [Gerson J. М. et al., 1980]. Активность ЕК-клеток в опухолях in situ аналогична таковой в селезенке мышей-опухоленосителей. Добавление интерферона и удаление прилипающих лимфоидных клеток из взвеси клеток опухолей приводили к усилению актив­ности ЕК-лимфоцитов.

Описанные популяции NK-кдеток обычно функционируют в комплексной системе, осуществляя комплементнезависимый лизис нормальных и опухоле­вых клеток, не покрытых антителами. Точные структуры антигенных детер­минант клеток-мишеней не определены. Допускают, что такими структурами могут быть простые сахара, поскольку NK- и NC-связанная цитотоксичность ингибируются добавлением низких концентраций сахаров, однако в NC-сис- теме с некоторым преимуществом для D-маннозы [Stutman О., 1982].

Нельзя исключить, что стадия распознавания эффекторными клетками СКЦ обусловливается либо рецептором, ограниченным специфическим антигеном, либо на популяциях ЕК-клеток экспрессируются различные рецепторы, т. е. одна клетка содержит множественные рецепторы разной специфичности, од­нако все эти рецепторы не ограничены системой МНС [Stem Р. et al., 1980; Bonavida В., 1984]. Р. Stem и соавт. (1980) исследовали участие ЕК-клеток (использовали клетки селезенки) в деструкции клеток эмбриональной карци­номы мышей, лишенных антигенов МНС. ЕК-клетки эффективно лизирова­

ли клетки опухоли (линии PSMB, OC15S1, Nul-li-SCCl, РС13), а дифферен­цированные эндодермальные клетки мышей лизировались либо хуже (линии OC15S1-END и PSA5E), либо были полностью резистентны к лизису (линии PYS-2 и 9.АС.9). Лизис чувствительных клеток-мишеней не устраняйся ад­сорбцией клеток селезенки на нейлоновой вате или обработкой клеток селезен­ки одним комплементом либо в сочетании с антисывороткой против Thy-І. Вы­явлена способность ЕК-клеток прикрепляться к монослою клеток эмбриональ­ной карциномы. Авторы считают, что, поскольку на клетках данной опухоли отсутствуют антигенные продукты МНС, эти клетки являются удобными ми­шенями для разделения естественной киллерной активности, опосредованной ЕК-лимфоцитами, от Т-гсзеточной индуцированной цитотоксичности. Изуче­на связь между естественной цитотоксичностью и киллерной функцией акти­вированных Т-лимфоцитов. Показано, что обе цитотоксичности генерируют­ся самостоятельно in vitro (Masucci М. et al., 1980].

Оказалось, что бестимусные мыши nude (безволосые) обладают наиболее высоким уровнем ЕК-клеток, причем у самцов они более активны, чем у са­мок [Welsh R., 1978]. Наибольшее количество ЕК-лимфоцитов, как и К-кле­ток, определяется в селезенке и периферической крови, в то время как в лим­фатических узлах и костном мозге они находятся в незначительном количес­тве, а в тимусе и грудном протоке практически отсутствуют [Haller О. A. et al., 1978; Eremin О. et al., 1980]. ЕК-лимфоциты нс фагоцитируют, не прилипают к стеклу, пластику и нейлоновой вате. Вместе с тем выявлена субпопуляция ЕК-клсток, которые в отличие от типичных клеток этого типа прилипают к нейлоновой вате и могут неспецифически лизировать любые нсопластичсски трансформированные клетки (Kali М. А., Koren Н. S., 1978; Roder J. С., Kiessling R., 1978; Barada F. A. et al., 1980]. Цитотоксическое действие ЕК- лимфоцитов не зависит от числа моноцитов, а в некоторых случаях даже снижается в присутствии последних [Levy Е. М. et al., 1978; Santoli D. ct al., 1978]. Однако имеются исследования, в которых отмечена, наоборот, макси­мальная активность ЕК-клеток при добавлении моноцитов [De Vries J. Е. ct al., 1978]. Показано, что активированные макрофагм играют большую роль в регуляции активности ЕК-лимфоцитов [Santoni A. ct al., 1980].

Обнаружена регуляция естественной киллерной активности ЕК-лимфоци- тов интерфероном. N. Minato и соавт. (1980) установили, что клетки селезен­ки мышей nude способны вырабатывать интерферон и обладают естественной киллерной активностью по отношению к инфицированным персистирующи­ми вирусами опухолевым клеткам, но не к неинфнцированным клеткам жи­вотных с опухолями в условиях in vitro. Показано, что клетки, выделяющие игггерферон и обладающие естественной киллерной активностью, представ­лены одним и тем же фенотипом Qa5\ Ly5* и несут ганглио-N-тетраозилцера­мид; 35% клеток указанного фенотипа экспрессируют на мембране антиген Ly 1,2. Естественная киллерная активность против зараженных вирусами опу­холевых линий клеток неспецифически усиливается в условиях in vitro и in vivo при предварительном контакте с инфицированными вирусом опухолевы­ми клетками. Причем в усилении активности участвует химически гомоген­ный интерферон. Оказалось, что клетки — мишени для действия интерферо­на серологически отличаются от клеток, обладающих естественной киллер­ной активностью. Обработка клеток селезенки антисывороткой против анти­гена Ly5 и комплементом приводила к утрате этой активности и способности вырабатывать интерферон. Однако при инкубации с интерфероном в течение

1—3 ч как естественная цитотоксичность, так и чувствительность к обработке антисывороткой против антигена Ly5 и комплементом восстанавливались. Обработка спленоцитов антисывороткой пролив антигена Qa5 и комплемен­том отменяла естественную киллерную активность, которая не восстанавли­валась при добавлении экзогенного интерферона. Авторы пришли к заключе­нию, что интерферон продуцируется клетками фенотипа Ly5 при ответе на зараженные вирусами опухолевые клетки и действует на клетки — предшественники этого фенотипа, вызывая их дифференцировку в эффекторные клетки фенотипа Ly5*, обладающие естественной киллерной активностью. Предполагают также, что интерферон может действовать опос­редованно, индуцируя выделение лимфокинов, которые в свою очередь активи­руют Е К-лимфоциты. Таким образом, все агенты, индуцирующие продукцию ин­терферона, способствуют усилению естественной киллерной активности.

Среди ЕК-клсток различают эндогенные естественные киллеры, присутству­ющие у мышей в норме в небольшом количестве, и индуцированные, которые появляются после стимуляции интерфероном [Welsh R., 1978 J. Специфичность и появление эндогенных ЕК-лимфоцитов генетически предстсрминированы уров­нем костномозговых клеток-предшественников. Степень чувствительности к эн­догенным и индуцированным ЕК-клсткам разных клеточных линий различна. Однако установлено, что вследствие индуции in vivo ЕК-клетки мышей приобре­тают способность лизировать большое число клеток исследованных линий неза­висимо от их чувствительности к эндогенным ЕК-лимфоцитам. Показано, что индуцированные ЕК-клетки экспрессируют на мембранах Q-антигсна больше, чем эндогенные. Чувствительность к лизису, вероятнее всего, связана с локаль­ным повышением уровня интерферона или с изменением мембраны и не корре­лирует с ієнами МНС. Следует отметить, что ЕК-лимфоциты некоторых линий мышей могут лизировать сингенные клетки-мишени. Полагают, что это может играть определенную роль в аутоиммунных процессах.

Развитие, активность и функционирование ЕК-клеток контролируются по- л и генно. Эти гены наследуются по доминантному тину, один из локусов сцеплен с генами Н-2 (основного комплекса гистосовмсстимости). Вместе с тем в популя­ции нетипичных ЕК-лимфоцитов, неспецифически прилипающих к нейлоновой вате, нс обнаружено генетического контроля [RoderJ. С., KicsslingR., 1978]. Пос­кольку ЕК-клетки способны оказывать цитотоксическое действие на клетки ро­дительского генотипа, считают, что их активность тесно связана с функциониро­ванием клеток, ответственных за проявление аллогенной ингибиции и контроли­руемых генами гемопоэтической гистосовмсстимости — генами Hh [Lotzova Е., Savary С. А., 1977; Savary С. A., Lotzova Е., 1978; Welsh R., 1978]. Кроме того, выявлена связь ЕК-лимфоцитов с М-клетками, опосредующими генетически де­терминированную резистентность мышей к воздействию вируса эритролейкоза Френд на гемо- и иммунопоэз, которые также контролируются генами Hh [Welsh R., 1978].

Обнаружена спонтанная цитотоксическая активность, направленная против свежсвыделснных (некультивированных) солидных опухолей человека, опосре­дованная нестимулированными моноцитами и ЕК-клетками [Itoh К. et al., 1987]. Эта цитотоксичность проявлялась в отсутствие эндотоксина. Обработка моноци­тов анти-Leu I lb и airrH-Lcu7-MAT и комплементом не приводила к снижению их литической активности, направленной против клеток меланомы. Фракция лей­коцитов Leu lib*, обогащенная ЕК-клетками, также лизировала свежсвыделсн- ные клетки меланомы. Добавление рекомбинантного у-интерферона в тест-сис­

тему или предварительная обработка монолитов этим препаратом способствова­ли значительному усилению их литической активности против клеток солидных опухолей. Монолиты теряли литическую активності, в результате 3-дневного куль­тивирования, однако добавление рекомбинантной) у-интерферона в начале куль­тивирования предотвращало потерю цитотоксической активности.

СЦК может осуществляться рагзичными механизмами. Например, обнаруже­ны медиаторы — лимфотоксин и естественный киллерныи цитотоксический фак­тор (ЕКЦФ). Они синтезируются ЕК-клетками и участвуют в лизисе клеток-ми­шеней [WrightS. С., Bonovida В., 1981; Bonovida В ., 19X4). Клетки-мишени в свою очередь экспрессируют рецептор для ЕКЦФ [Hiserodt I. С. et al., 1983). Другой механизм литического действия эффекторных клеток СКЦ обусловлен обра­зованием литического комплекса (ассоциированного с трансферрином) ЕК- клетки с клеткой-мишенью, несущей на поверхности рецептор для трансферри­на |Baines М. G. et al., 19X3). Одновременно с этим рецептором определенную роль в цитолизе клеток играет и низкоавидный рецептор (ММ 40 (XX)) для IgG (Fey), распознаваемый ЕК-клетками |Perl A. et al., 19X6). Таким образом, низко­аффинный Fey-рецептор и рецептор для трансферрина могут бьггь альтернатив­ными или одновременно функционирующими мишеневыми структурами на клет­ках, чувствительных к лизису, осуществляемому ЕК-клетками.

Из больших гранулярных лимфоцитов человека изолирован белок с молеку­лярной массой 70 ООО, обладающий цитотоксическими свойствами [Zalman L. S. et al., 19X6). По иммунохимическим свойствам этот белок подобен белку С9 (ком­понент 9 комплемента человека).

Итак, ЕК-клетки представляют собой большие гранулярные лимфоциты, име­ющие низкоаффинные Fc-рецепторы для иммунных комплексов с IgG (FcR-III илиСОІб) и антигеном N КН-1 (Leul9)c неизвестными функциями [PerussiaB., Trinchieri G., 19X8). Эти лимфоидные клетки участвуют в противоопухолевой за­щите, поскольку они способны лизировать некоторые опухолевые клетки без пред­варительной сенсибилизации; онитакже участвуют в защите от вирусных инфек­ций и в регуляции процессов гемопоэза и дифференцировки В-клеток. Рецеп­торные молекулы ЕК-лимфоцитов пока нс выявлены. Хоти гбнаружено, что по­верхностная молекула CD2 определенных клонов ЕК-клеток обусловливает их способность связываться с клетками-мишенями и лизировать их [Nakamura Т. ct al., 199PJ. Определена также молекула, обозначенная NKR-PL, функционирую­щая как рецептор, способный селективно запускать киллерную активность ЕК- клеток [Giorda R. et al., 1990). Следует также отметить, что до сих пор ЕК-клет­ки, несмотря на четкие их отличия от других типов лимфоидных клеток, не отне­сены к отдельной клеточной линии, поскольку для этот нет достаточных крите­риев. Поэтому в настоящее время нельзя исключить, что ЕК-лимфоциты могут быть родственны Т-клеткам, от которых они дивергируют на ранних стадиях со­зревания, до реаранжировки специфических функциональных генов. Установле­но, что многие цитокины (в частности, ИЛ-2, ИЛ-6 и др.) обладают прямым дей­ствием на секреторную и цитотоксическую активность ЕК-клеток in vitro [Smyth М. J. et al., 1990; Lewis С. E. et al., 1991 J.

Наконец, третий тип антителозависимой клеточной цитотоксичности выполняет также существенные надзорные функции в поддержании постоянства внутренней среды животных и человека, проявляя ан­тителозависимую цитотоксичность против различных чужеродных клеток (алло­генных и аутологичных лимфоцитов, ксеногенных эритроцитов и др.), в том чис­ле и опухолевых. Причем у больных с опухолями разной локализации интенсив-

ность антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ) значительно боль­ше, чем у здоровых лиц. Установлено также, что активность ЕК-лимфоцитов у онко.лоіических больных снижена, а К-клеток наоборот, повышена. Помимо тран­сплантационного и противоопухолевого иммунитета, АЗКЦ участвует в аутоим­мунных процессах и элиминации инфекционных агентов [Брондз Б. В., Рохлин О. В., 1978; Guttirez G. F., 1978; Keller R., 1981; Nelson D. L., 1981; Кimber J., Moore M., 1983; Bakacs T. ct al., 1984J.

Основными эффекторами АЗКЦ являются К-лимфоциты (Killercells — клет­ки-киллеры). Они обладают цитотоксической активностью в отсутствие компле­мента без сенсибилизации (от интактных животных) в отношении клеток-мише­ней, покрытых специфическими антителами. Морфологически К-клетки пред­ставляют собой малые и средние лимфоциты [Hieschberg Н. et al., 1975; Strom Т. В. et al., 1975]. Кроме К-клеток, эффекторами АЗКЦ моїуг быть мононукле- арные фагоциты, полиморфно-нуклеарные лейкоциты, Т-лимфоциты и большие зернистые лимфоциты, содержащие на своей поверхности Fc-рецептор (Маянс- кий А. Н., 1983; Nathan С. et al., 1980; Bradley Т. Р., Bonavida В., 1982; Absheikhly A. et al., 1984]. Эффекторы АЗКЦ вызывают деструкцию сингенных, аллогенных и ксеногенных клеток-мишеней, несущих нормальные, а также измененные ви­русами и химическими канцерогенами и т. д. поверхностные антигенные детер­минанты. Для лизиса клеток-мишеней необязательно, как отмечалось, присутст­вие комплемента или его компонентов, однако их наличие усиливает этот про­цесс.

К-лимфоцитам нс свойственна фагоцитарная активность, и они нс прилипа­ют к нейлоновой вате и стеклу. Природа клеток этой гемопоэтической линии окон­чательно нс установлена,» поэтому пока преждевременно говорить о какой-либо особой популяции данных клеток. Полагают, что их можно отнести и к еще не- идентифицированным предшественникам Т- или В-клсток. Некоторые авторы отождествляют их с 0-лимфоцитами. Нельзя также исключить, что К-лимфоци- ты представляют собой гетерогешгую популяцию с высокой плотностью Fc-pe- цегггоров на мембране ]Wisloff A. ct al., 1974; Brier А. М. et al., 1975; Oers M. H. et al., 1977]. Цитотоксичность К-лимфоцитов очень высока: одна клетка может лизировать не менее 10 клеток-мишеней [Брондз Б. В., Рохлин О. В., 1978]. АЗКЦ зависит от многих факторов и требует непосредственного контакта эффектор­ных К-клеток с клетками-мишенями. Последние должны быть покрыты специ­фическими антителами, обусловливающими специфичность АЗКЦ своими ан- тигенкомбинирующими участками. Эффектор АЗКЦ несет на своей поверхнос­тной мембране рецептор для Fc-фрагмента Ig, в то же время клетка-мишень, фиксирующая антитела, должна содержать рецепторы для Fab-фрагмснтов. Ре­цепторная молекула CD16, узнающая Fc-фрагмент IgG, может выполнять функ­цию структуры, запускающей литическую активность [Kalmar L. et al., 1978; Ма- cLennanJ.C., 1978; Nelson D. L., 1981; Lanier L. L., Phillips J. R., 1986; Hersey P., Bolhuis R. L., 1987]. Таким образом, для осуществления АЗКЦ необходимо учас­тие трех непременных компонентов: эффекторных клеток, клеток-мишеней и антител, специфичных относительно этих клеток. Необходимость покрытия кле­ток-мишеней специфическими антителами является основным отличием меха­низма лизирующего действия эффекторов АЗКЦ от аналогии ного процесса СКЦ.

Вместе с тем К-лимфоциты, так же как и ЕК-клстки, имеют на мембранах высокую плотность Fc-рецепторов для IgG. Удаление лимфоцитов, содержащих Fc-рецептор, или же блокада этого рецептора агрегированным IgG либо комплек­сом антиген — антитело всегда приводит к исчезновению цитотоксичніхгти [ Jondal

C., Press Н., 1975; Walder et al., 1976; Muchmore A. V. et al., 1977; Parrillo J. E., Fanci A. S., 1978]. Иммуноглобулины, сенсибилизирующие клетку-мишень для АЗКЦ, относятся к IgG, а противоопухолевое действие в комплексе с эффекто­рами осуществляют IgG -антитела, но нс IgG - или IgG -антитела [ Landlois A. J. etal., 1985].

Считают, что специфичность действия ЕК-лимфоцитов обусловливается по меньшей мере двумя факторами: наличием на их мембране ЕК-рецепторов для определенных клеток-мишеней и специфичностью естественных IgG-антител, связываемых Fc-рсцепторами [Takasugi М. et al., 1977]. Следовательно, ЕК- и К- лимфоциты, но-видимому, представляют собой различные субпопуляции, одна из которых содержит ЕК- и Fc-рецепторы, а другая —только Fc-рецептор, «фо­кусирующий» эффектор на клетку-мишень. Показана их гетерогенность по фун­кциональной активности и антигенным маркерам, а также по чувствительности к действию различных молекулярных регуляторов иммунологических реакций. Например, интерферон повышает, а простагландины (ПГ) ПГЕ,, ПГЕ₂ и 0,1% проназа снижают активность ЕК-лимфоцитов, в то же время первые два препара­та нс влияют на К-клстки, а проназа, наоборот, усиливает их активность в АЗКЦ. Простые сахара не влияют на АЗКЦ и одновременно блокируют спонтанную кле­точную цитотоксичность [KimbcrJ.,MoorcM., 1981;McMcrmottR. Р. ct al., 1981; Kim Y. В., HuhN. D., 1982; Merrill J. E., 1983]. Установлено, что анти-ЕК-сыво- ротка в определенных разведениях и комплемент блокируют активность ЕК-кле­ток, но нс действуют на К-клетки [Huh N. D. et al., 1981 ]. Антитела против F(ab)₂- фрагмента человеческого IgG резко снижают лизирующую способность К-лим- фоцитов и нс влияют на активность ЕК-клегок [ Bolhuis R. L. et al., 1978]. Нако­нец, МАТ против КС-1-антигена, экспрессированного на поверхностной мем­бране ЕК-лимфоцитов, специфически блокируют их активность и не влияют на соответствующие эффекторы в АЗКЦ и индуцированной клеточной цитотоксич­ности.

Все изложенные выше факты убедительно указывают на то, что ЕК- и К-клст­ки скорее всего являются разными популяциями лимфоцитов, а СКЦ и АЗКЦ, включающие этих эффекторы, являются независимыми типами клеточной цито­токсичности и осуществляются различными механизмами.

Итак, на основании имеющегося материала можно предполагать, что СКЦ и АЗКЦ представляют собой весьма эффективные автономные, сильно реагирую­щие защитные системы, которые могут распознавать широкий спектр антиіен- ных детерминант и в силу этот, вероятно, контролировать возникновение глав­ным образом спонтанных моноклональных новообразовании. В пользу значитель­ной роли ЕК- и К-лимфоцитов в противоопухолевой защите свидетельствуют сле­дующие факты: 1) низкая частота спонтанных опухолей у бестимусных мышей и вообще у мышей с высоким содержанием ЕК- и К-лимфоцитов; 2) прямая корре­ляция активности ЕК-клеток in vivo и резистентности к индукции бластоматоз­ного процесса; 3) мыши с высоким содержанием ЕК-лимфоцитов более резис­тентны к сингенной лимфоме; 4) стимуляция активности ЕК-лимфоцитов ин­терфероном или другими агентами повышает противоопухолевую резистентності,; 5) мыши с блокированными облучением Т- и В-системами иммунитета, но со­храненной активностью ЕК-лимфоцитов резистентны к транс плантации опухо­левых клеток; 6) противоопухолевая резистентность у мышей с полностью бло­кированной системой иммунитета восстанавливается костным мозгом, обрабо­танным анти-т-сывороткой от мышей с высокой активностью ЕК-клеток. Кроме того, в клинике отмечены ремиссии у больных с лимфомами и другими злокачес­

твенными новообразованиями в процессе лечения интерфероном, что связано с повышением активности ЕК-лимфоцитов.

Считают, что СКЦ и АЗКЦ являются первым неспецифическим звеном про­тивоопухолевой зашиты. Эта система иірает важную роль в иммунологическом надзоре, осуществляя в основном распознавание и элиминацию очень м'алмх (в том числе и единичных клеток) количеств неопластически трансформированных клеток. Вероятно, одновременно начинает функционировать и специфическая противоопухолевая защита, при которой вырабатываются специфические анти­тела и ЦТЛ в ответ на специфический трансплантационный опухолевый анти­ген. Эта система способна отторгать уже большие количества опухолевых кле­ток. Иными словами, эти две системы значительно дополняют друг друга, пос­кольку первая распознает и уничтожает Неопластические клетки в субпороговых количествах, а вторая элиминирует относительно большие количества таких кле­ток. Указанные системы, по-видимому, не только дополняют, но и зависят друг от друга. С одной стороны, появление даже небольших количеств специфических антител, например, обеспечивает условия для цитотоксического действия К-лим­фоцитов в АЗКЦ, а с другой — установлено, что ЕК-лимфоциты способны син­тезировать факторы роста и дифференцировки В-клеток, т. е. тем самым повы­шать ^моральный иммунный ответ [Procopio A. etal., 1985; Brenner М. etal., 19861.

Предполагают даже, что при подавлении системы естественной резистеїггности нс функционирует и система специфического противоопухолевого иммунитета. Во всяком случае АЗКЦ служит наиболее ярким примером кооперативного вза­имодействия гуморальных и клеточных факторов иммунитета. Важно отметить, что ЕК-лимфоциты появляются у мышей и других животных только на 3—4-й неделе жизни, т. е. тогда, когда заканчивается интенсивная пролиферация кле­ток, обусловленная ростом оріанизма. Следовательно, в период, когда наиболее возможно появление неопластически трансформированных клеток, основіїую роль в иммунолоіичсском надзоре, вероятно, выполняют эффекторы АЗКЦ, обнару­живающиеся перед рождением животных, и антитела, которые продуцируются уже на 2-й день после рождения. Причем естественные антитела, необходимые для проявления этой цитотоксичности, нс включаются в активность ЕК-клеток |Кау D. et al., 1977; Kim Y. В., Huh N. D., 1982; Hirokawa K., 1991 J.

К сказанному следует добавить, что В-лимфоциты продуцируют широкий спектр медиаторов, обладающих цитотоксическим действием (лимфотоксины, наделенные свойсгвами эффекторной киллерной молекулы), В-клсточный сти­мулирующий (суирессирующий) фактор, естественный активирующий фактор (стимулирует СКЦ), колониестимулирующий фактор, интерферон, ФНО (ФНО для В-лимфоцитов идентифицирован как ФНО-h). ФНО также секретируется ЦТЛ, ЕК-клстками, моноцитами и макрофагами и является одним из основных цитотоксических медиаторов, вызывающих некроз опухолей in vivo и лизис опу­холевых клеток in vitro [Навашин С. М., Вядро М. М., 1989; Yurgensen С. Н. et al., 1986; Ohno Т. et al., 1988]. Все перечисленные медиаторы играют существен­ную роль в деструкции как аутологичных, так и аллогенных злокачественных но­вообразований. Определенный интерес в этом отношении представляют также цитотоксические факторы I (N-терминальный фрагмент которого идентичен ФНО- Р), П (по нескольким показателям отличается от ФНО-а и ФНО-р) и мембран­ный ИЛ-1. Они синтезируются В-лимфоцитами и лизируют некоторые типы опу­холей, в частности клетки различных сарком, карцином и лейкозов человека. Су­щественно, что фактор I, введенный мышам с проірсссирующими саркомами, значительно повышал их выживаемость (Каїра* А., 1977; Neumann Н., Karpas А.,

1981; Acres R. В. et al., 1987; Bonnefloy Y. et al., 1989; Yamanaka H., Karpas A., 1989).

Следует обрагить внимание и на успехи, связанные с терапией онкологичес­ких больных с применением колониестимулирующих ФР, полученных с помощью рекомбинантной технологии (ГМ-КСФ, К-КСФ, М-КСФ, ИЛ-3, эритропоэтин (Эпо)). С одной стороны, это позволило использовать в 2 раза более высокие дозы химиопрспаратов, а с другой — способствовало ускорению восстановления кос­тного мозга пациентов (Vandhan-Raj S. etal., 1989; Weiss R., 1989; Wolf M., 1989).

С помощью ретровирусного вектора G. Ferrari и соавт. (1990) индуцировали экспрессию человеческого Г-КСФ в низкоиммуногенной мышиной аденокарци­номе толстой кишки С26, которую прививази сингенным или бестимусным мы­шам. Антитела против Г-КСФ усиливали рост опухоли С26, продуцирующей Г- КСФ. При введении смеси продуцирующих и непродуцирующих Г-КСФ клеток С26 рост опухолей подавлялся при их соотношении более 10:1. Противоопухоле­вый эффект Г-КСФ авторы связывают с ею активирующим воздействием на не­йтрофилы.

Известно, что активация иммунокомпетентных клеток для проявления про­тивоопухолевой цитотоксичности осуществляется многочисленными разно­образными стимулами. Остановимся на основных стимулах и прежде всею отмстим, что контакт культуры лимфоцитов и клеток опухоли сопровожда­ется активацией цитотоксических эффекторов — различных популяций Т- лимфоцитоя и лимфоцитов, обладающих естественной киллерной актвкостью (в том числе и большие зернистые лимфоциты), распознающих свои анти­генные детерминанты и лизирующих клетки-мишени аутологичных опухо­лей (Klein Е., VanKy Е, 1981).

Показано, что аллогенная смешанная культура лейкоцитов генерирует два типа цитотоксических эффекторных клеток, один из которых сенсибилизирован аллоантигенами клеток-мишеней (аллос- пецифический цитолиз); эффекторы второго типа лизируют неопределенные клетки-мишени опухолей и клетки некоторых клеточных линий (неспсци- фический «аномальный киллинг», по J. К. Seeley и соавт., 1979). Оба цито­лиза могут осуществляться Е-розсткообразующими Т-клетками, однако Т-лим­фоциты, обусловливающие аномальный киллинг, ио некоторым показателям отличны от Т-лимфоцитов и их природа пока не установлена. Полагают, что они представляют собой ЕК-подобные клетки (Zarling J. М. et al., 1981; Bums A. et al., 1984; Shortman К., Wilson A., 1985). Оказалось, что MAT против антигенов эффекторов ТЗ, Т4 и Т8 Т-лимфоцитов резко снижают аллоспеци- фический и не действуют на аномальный цитолиз (De Vries I. Е., Spits Н., 1984; Monsigny М., 1984; Shortman К., Wilson А., 1985). На основании этих данных предполагают, что клетки, стимулированные в смешанной культуре лейкоцитов, несут на своей поверхности два независимых рецептора: один Т-клеточный, ограниченный МНС, и второй распознающий неопределенные антигенные детерминанты на клетках опухолей. Такими распознаваемыми молекулами могут быть углеводы, входящие в состав гликопротеидов клеточ­ных мембран. Действительно, в последующем были представлены данные, сви­детельствующие отом, что на эффекторных клетках экспрессируется рецеп­тор лектинового типа. Он взаимодействует с углеводным компонентом (воз­можно, с ганглиозидом GD_}) опухолеассоциированного гликопротеида, ци­топлазматической мембраны клеток-мишеней различных злокачественных но­вообразований (WcrkmeisterJ. A. etal., 1985).

Причина стимула активации цитотоксических эффекторов в аутологичной смешанной культурслимфоцитов (А С К Л) неясна. Считают, что основным компонентом является 1а-антигсн, экспрессиру­ющийся на поверхностных мембранах некоторых клеток оріанизма. Эффекторы АСКЛ успешно лизируют клетки-мишени лимфобластоидных линий, в том чис­ле и лимфомы Беркитта, которые, как правило, резистентны к цитотоксическо­му действию ЕК-клеток [Goto M.,Zvai Пег N. I., 1983]. Лизис этих клеток не зави­сел от присутствия на их поверхности 1а-антигена и коррелировал с содержани­ем эффекторных 4Р-2-лимфоцитов. МАТ 9,6 и 4F-2 блокировали цитотоксич­ность указанных эффекторов, которые не содержали маркеров ЕК-клеток (ЕК- 0КМ1 и Lcu7, HNK-1) и маркеров ЦТЛ (ОКТ8 и 9,3) |Goto М., Zvaifler N. I., 1983].

В качестве активаторов ЦТЛ широко используют интерферон и ИЛ-2. Стимуляция интерфероном приводит к активации различных эффекторов ЕК- клсток, Т-лимфоцитов и макрофагов, лизирующих клетки-мишени аутологич­ных опухолей. Причем уинтерферон, реагируя с соответствующими рецептора­ми на макрофаіах, примирует их для нсспсцифичсского лизиса опухолевых кле­ток и усиливает экспрессию 1а- и DR-антигенов [Шпарык Я. В.идр., 1991; Chang A. Y. et al., 1986; Krown S. E., 1988]. Лизис клеток меланомы человека аутоло­шчными ЦТЛ также резко усиливался под действием уинтерферона и ФНО-а [Wcilvan К. Е. et al., 1991 ]. Показано, что уинтерферон играет ключевую роль в развитии нсрсстриктированного по антигенам МНС цитотоксического ответа в процессе вирусной инфекіщи, в частности герпесвирусной типа I [Campos М. et al., 1989]. Многообразие же воздействий интерферона, обнаруженных к настоя­щему времени (иммуномодулирующее, противовирусное, антимикробное, антип- ролиферативное и др.) и свидетельствующих о широких коїпрольно-регулятор­ных функциях этой системы, направленных на сохранение гомеостаза, описано в обзоре Ф. И. Ершова и соавт. (1990).

Для усиления противоопухолевой цитотоксичности совместно с интерферо­ном часто применяют дополнительную стимуляцию эффекторов липополисаха- ридами, эндотоксинами или же некоторыми убитыми микроорганизмами [Sol- dateschi D. et al., 1984]. Обнаружено синергичное действие ФНО и интерферонов (особенно с у интерфероном); они увеличивают цитотоксическую активность мак­рофагов и Т-лимфоцитов по отношению к опухолевым клеткам, в том числе и к клеткам опухоли яичника человека, трансплантированной мышам линии nu/nu [Old L. J., 1987; Tavcme J. et al., 1987].

ВобзореО. Г. Анджапаридзе и Э. Р. Пилле (1989) приведена информация, сви­детельствующая о значительной интенсификации исследований противсюпухо- левого действия интерферона после разработки его рекомбинантных препаратов. Оказалось, что терапевтическое действие интерферона, особенно в больших до­зах (1,5x10⁶ ME ежедневно в течение 2 нед), наиболее выражено при гемопоэти­ческих неоплазиях: волосатоклеточном лейкозе, лимфомах нс-Ходжкина, хро­ническом миелогенном лейкозе, кожной Т-клеточной лимфоме и в меньшей сте­пени при множественной миеломе. Из новообразований иного происхождения наиболее_чувствителы