3.2. УЧАСТИЕ ФОСФОБЕЛКА р53 В МЕХАНИЗМЕ АУТОСТИМУЛЯЦИИ ПРОЛИФЕРАЦИИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК

Иммортализация, как уже отмечалось, является универсальной чертой опухолевого роста. Вместе с тем бесконечность самоподдержания необходи­ма, но недостаточна для озлокачествления (обусловливаются различными генами), т.

Язя доказательства участия этого белка в усилении синтеза ДНК опухоле­выми клетками посредством их самораспознавания А.И. Агеенко и соавт. (1990) использовали МАТ против р53. В однонаправленную смешанную куль-

Рис 31 Участие фосфобелка р53 в стимуляции синтеза ДНК в опухолевых клетках в смеишннои культуре с клетками эмбрионов мышеи

а — опухоль SA7 б — опухоль РШМ=5 1 — опухолевые клетки 2 — опухолевые клетки +- клет ки 18 суточного плода обработанные сывороткой интактных мышеи 3 — опухолевые клетки + клетки 10 суточного эмбриона обработанные сывороткой интактных мышеи 4 — опухоле вые клетки + клетки 18 суточного плода обработанные МАТ против р53 5 — опухолевые клетки * клетки 10 суточного эмбриона обработанные МАТ против р53 В опухолевых клетках уровень синэета ДНК принят за I По оси ординат — относительный уровень синтеза ДНК

туру клеток саркомы SA7(C8) и рака РШМ-5 в качестве стимулирующих добавляли клетки 10—12- и 18-днсвных эмбрионов мышей линии СВА, пред­варительно обработанные и необработанные МАТ против р53 (гибридома рАв-421) Установлено (рис 31), что стимуляция синтеза ДНК в клетках опухолей SA7(C8) и РШМ-5 наблюдается при контакте их с клетками 10—12- дневных эмбрионов, предварительная обработка эмбриональных клеток МАТ против р53 полностью блокирует этот эффект (р0,()5).

Milner J.0., Cook A., 1986; Schreicr A.A.,

Gruber J., 1990]. Иными словами, для оценки действия МАТ против р53 на синтез ДНК в опухолевых клетках пред­почтительнее использовать синхронизи­рованные культуры. Вместе с тем факт постоянной «компетентности» опухоле­вых клеток отвечать стимуляцией син­теза ДНК в смешанной культуре с клет­ками 10—12-днсвного эмбриона указы­вает на то, что экспрессия рецептора опухолевых клеток, распознающего эм­бриональные поверхностные детерми­нанты (одной из которых, как показали наши данные, являются эпитопы белка р53), сохраняется, по-видимому,на всех фазах клеточного цикла.

В совокупности все приведенные факты свидетельствуют о наличии в опухоли (любого происхождения) механизма аутостимуляции пролиферации, реализующегося при контакте опухолевых клеток друг с другом. Установле­но, что увеличение концентрации клеток опухоли приводит к ожидаемому усилению синтеза ДНК (рис. 33). Это, по нашему мнению, может служить прямым доказательством в пользу упомянутого механизма аутостимуляции пролиферации опухолевых клеток.

Таким образом, в опухолях функционирует механизм аутостимуляции пролиферации, реализующийся при контакте клеточных поверхностей. В

223

этом процессе участвует эпитоп эмбриоспецифического белка р53, который, по-видимому, не входит в состав рецептора клеток опухоли, распознающего этот белок в отличие от детерминанты ЭПА-10.

Итак, детерминанта ЭПА-10 является комплексной структурой и содер­жит как минимум эпитоп фосфобелка р53 — продукта антионкогена — и идиотипичсскую детерминанту рецептора иммунологическою распознава­ния. Иными словами, эмбриоспсцифичсская детерминанта ЭПА-10, являю­щаяся константной поверхностной структурой опухоли (ее единым антиген­ным маркером), обеспечивающей аутостимул пролиферации ее клеток, вхо­дит в состав как распознаваемой части ЭПА-10, так и рецептора иммунологи­ческого распознавания. Следовательно, эта эмбриоспецифнческая детерми­нанта является также универсальным признаком опухолевой системы.

Процесс распознавания, завершающийся индукцией синтеза ДНК, веро­ятно, является вмсгюспекифичным (ею специфичность обусловливается эм­бриоспецифической детерминантой ЭПА-10) и начинает функционировать только при контакте иммортализированных или опухолевых клеток.