Газохроматографическое определение этиленгликоля

Качественное определение. По 2—3 мкл извлечений из крови или мочи (мочевого пузыря, внутренних органов) вводят в ко­лонку газового хроматографа при вышеуказанных условиях. Идентификацию пика ЭГ осуществляют по абсолютному вре­мени удерживания.

Количественное определение ЭГ проводится методом внут­реннего стандарта, в качестве которого используется 1,2-про-

пиленгликоль (ПГ) или, при его обнаружении, н-бутанол. Чувствительность определения: 1 мкг ЭГ в 2 мкл водного рас­твора. Диапазон линейности: концентрации ЭГ в интервале 50—5000 мг% (8—800 ммоль/л).

В пенициллиновом флаконе тщательно смешивают равные объемы исследуемого объекта (моча, плазма крови или извле­чение из мочи или крови) и внутреннего стандарта (300 мг% или 3% раствор ПГ в зависимости от содержания ЭГ в объекте исследования). 2—3 мкл смеси вводят в колонку газового хро­матографа при описанных выше условиях.

Расчет концентрации ЭГ производят по предварительно построенному калибровочному графику зависимости отноше­ния высот пиков ЭГ и пропиленгликоля.

При построении калибровочной кривой с использованием в качестве внутреннего стандарта 300 мг% раствора ПГ берут водные растворы ЭГ с концентрацией 100, 200, 300, 400 и 500 мг%. Калибровочные графики имеют вид прямой, начи­нающейся в точке пересечения координат (так как указанные концентрации ЭГ укладываются в диапазон линейности 50—5000 мг%). Калибровочные графики, построенные на во­дных растворах ЭГ, плазме крови и моче, практически совпа­дают между собой, что позволяет использовать для количест­венного определения ЭГ в биологических жидкостях калибровку по его водным растворам.

При проведении количественного определения в извлече­ниях расчет концентрации ЭГ в крови, моче и внутренних ор­ганах осуществляется по формуле:

где: С_эг — концентрация ЭГ в крови или моче, мг% (или ммоль/л); С_ИЗЮ1 — концентрация ЭГ в водном извлечении, мг% (или ммоль/л); V — объем во­дного извлечения, мл; п — объем крови или мочи, взятый для определения, мл; % — усредненный процент выхода ЭГ по методике: для мочи — 73%, для крови — 62%.

Граница количественного определения — концентрация ЭГ в водном извлечении 50 мг% (8 ммоль/л)

Рис. 15. Масс-спектр этиленгликоля, выделенного из мочи