ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
Химико-токсикологическое исследование остатков яда и биосред пострадавших при острых экзогенных отравлениях является важнейшим компонентом диагностического процесса, относится к категории верифицирующих, его результаты в существенной мере влияют на объем и характер лечебных мероприятий.
Не являются исключением из этого правила и отравления алкоголем и его суррогатами.Методы определения этих веществ можно разделить на две неравнозначные подгруппы: экспресс-способы и способы собственно химико-токсикологического анализа. Экспресс-диагностика отравлений спиртами носит сугубо ориентировочный характер и основана на проведении цветных или осадочных проб, которые легко воспроизводятся в условиях обычных лабораторий. Хотелось бы подчеркнуть, что эти реакции не являются специфичными и могут быть использованы только для предварительной оценки наличия токсического агента в исследуемом материале.
Экспресс-определение метилового спирта в остатках принятой жидкости основано на его окислении до формальдегида и дальнейшей идентификации последнего органолептически или с помощью цветных реакций. Появление запаха формальдегида после погружения в исследуемую жидкость раскаленной медной проволоки свидетельствует о присутствии метанола в пробе. Подтверждением полученного результата может служить цветная реакция, основанная на образовании из кодеина под влиянием концентрированной серной кислоты (H2SO4) морфина, взаимодействие которого с формальдегидом сопровождается фиолетовым окрашиванием. Для этого после многократного внесения в исследуемую пробу раскаленной медной проволоки 1,0 мл жидкости смешивают с 5,0 мл концентрированной H2SO4 и осторожно по стенке (для предотвращения перемешивания) добавляют раствор кодеина (10 мг кодеина в 4,0 мл концентрированной H2SO4). Появление у стенок пробирки фиолетового кольца свидетельствует о присутствии формальдегида (метанола).
Что касается этилового спирта, то существует множество экспресс-методов его качественного и количественного определения в биологических жидкостях, выдыхаемом воздухе и остатках принятого яда. Однако все эти методы, как мы уже упоминали выше, могут использоваться только для ориентировочной оценки. Описание этих методов подробно изложено в соответствующей литературе.
Способность средних и высших алифатических алкоголей превращаться в окрашенные соединения под действием ароматических альдегидов (ванилина, бензальдегида, салицилового альдегида и других) может быть использована для обнаружения амиловых спиртов (реакция Комаровского). Обязательным условием определения является отсутствие в исследуемой пробе воды. Для этого проводят экстрагирование амиловых спиртов с помощью диэтилового эфира, после чего эфир выпаривают, а к остатку добавляют 1,0 мл 1%-ного спиртового раствора салицилового или других альдегидов и 3,0 мл концентрированной H2SO4. О наличии амиловых спиртов свидетельствует появление красной окраски.
Определение этиленгликоля в остатках принятой жидкости основано на его окислении до щавелевой кислоты с последующим образованием оксалатов. К 2,0 мл исследуемой жидкости добавляют 1 каплю 50%-ного раствора КОН и 5,0 мл 2%-ного раствора марганцовокислого калия, после чего пробу нагревают до кипения и фильтруют в чистую пробирку. Затем к фильтрату добавляют по каплям ледяную уксусную кислоту до кислой реакции (по лакмусовой бумаге) и несколько капель 10%-ного раствора хлорида кальция. Выпадение белого кристаллического осадка оксалата кальция, растворяющегося при добавлении нескольких капель концентрированной соляной кислоты (НС1), может свидетельствовать о наличии в пробе этиленгликоля.
Для обнаружения этиленгликоля в остатках принятой жидкости также используется реакция этиленгликоля с сульфатом меди в присутствии щелочи, в результате которой образуется соединение, имеющее синюю окраску (к 2,0 мл образца прибавляют 1—2 мл 10%-ного раствора едкого натра и несколько капель 10%-ного раствора сульфата меди).
Химико-токсикологический анализ — это совокупность методов, применяемых для выделения, обнаружения и количественного определения ядов и их метаболитов в биологическом материале и вещественных доказательствах отравления. Химико-токсикологический анализ включает в себя: отбор материала, подготовку проб, анализ биосред и остатков принятой жидкости, оформление результатов исследования.
Исследованию подвергаются первая порция промывных вод желудка, биологические жидкости (моча, кровь и спинномозговая жидкость), а также остатки принятых ядов. Забор промывных вод (200—250 мл) и мочи (по 200 мл) для анализа осуществляют в чистую сухую герметичную посуду.
При заборе крови большое внимание уделяется предупреждению попадания в пробу этилового спирта, используемого для обработки кожных покровов, что может значительно увеличить концентрацию последнего в анализируемом образце. В настоящее время забор проб для химико-токсикологического исследования биосред стандартизирован (Приказ М3 РФ № 9 от 08.01.2002 г.) — см. Приложение 2.
В связи с тем, что при комнатной температуре концентрация алкоголя может значительно увеличиваться из-за его новообразования (в крови до 1,0 и в моче до 0,5 г/л), пробы хранят в холодильнике при 0° С, а при необходимости длительной транспортировки — в термосе со льдом или в замороженном виде. При наличии в моче дрожжевой, бактериальной или смешанной флоры, особенно у лиц, страдающих сахарным диабетом, даже при хранении в холодильнике в пробах возможно образование этанола в концентрации более 1 г/л.
Пробы маркируют с обязательным указанием фамилии, имени, отчества больного, даты и времени забора, номера истории болезни. В направлении на химико-токсикологическое
исследование также указывают название лечебного учреждения, время с момента отравления, предварительный диагноз (нозологический или синдромальный), перечень исследуемых веществ, проводимую терапию (использованные препараты и их дозы), а также указывают фамилию, имя и отчество направляющего на анализ и его рабочий телефон.