Анализ экспрессии мРНК генов аденозиновых рецепторов аденозин- модифицированными моноцитами
Аденозин оказывает свои эффекты на клетки преимущественно за счет взаимодействия с аденозиновыми рецепторами четырех типов: Al, A2A, А2В и АЗ. Аденозиновые рецепторы типов Al, A2A и АЗ активируются под действием физиологических концентраций аденозина 0,01-1мкМ.
Рецепторы подтипа А2В, напротив, становятся активны при высоких концентрациях аденозина, наблюдаемых при патологических условиях (более 10 мкМ). A2A и АЗ рецепторы опосредуют преимущественно противоспалительные реакции, Al и А2В - провоспалительные.Профиль аденозиновых рецепторов клетки определяет характер ответа на стимуляцию аденозином. Поэтому определение экспрессии мРНК четырех подтипов аденозиновых рецепторов является важной задачей при характеристике модифицированных моноцитов. Профили экспрессии аденозиновых рецепторов при различных режимах стимуляции представлены на рисунках 15-18.
Рисунок 15 - Экспрессия мРНК генов аденозиновых рецепторов
нестимулированными моноцитами через 24 часа после начала культивирования.
Рисунок 16 - Экспрессия мРНК генов аденозиновых рецепторов моноцитами через 24 часа после начала культивирования с добавлением 30мкМ NECA.
Рисунок 17 - Экспрессия мРНК генов аденозиновых рецепторов
нестимулированными моноцитами через 72 часа после начала культивирования.
Рисунок 18 - Экспрессия мРНК генов аденозиновых рецепторов моноцитами через 72 часа после начала культивирования с добавлением 100мкМ NECA.
Определение профиля аденозиновых рецепторов показало
преимущественную экспрессию мРНК A2B аденозинового рецептора моноцитами периферической крови. Причем, если в нестимулированной культуре определяются лишь следовые количества мРНК генов A2A и АЗ, то после стимуляции аналогом аденозина NECA экспрессия мРНК генов этих рецепторов значительно увеличивается. В частности, в отсутствии стимуляции уровень экспрессии мРНК гена A2A при культивировании в течение 24 часов составлял 0,077±0,009% (3-актина, при добавлении ЗОмкМ NECA - 0,124±0,013% (3-актина (р=0,013). При культивировании в течение 72 часов экспрессия мРНК гена A2A рецептора находилась на уровне 0,074±0,010% (3-актина, при стимуляции 100 мкМ NECA достигала 0,2±0,020% (3-актина (р