Анализ иммунофенотипа моноцитов человека методом проточной цитофлуориметрии
Исследование экспрессии поверхностных кластеров дифференцировки проводили методом проточной цитофлуориметрии с использованием моноклональных антител на проточном цитофлуориметре FACSCanto II (Becton Dickinson, США).
Определяли уровень экспрессии CDla - молекулы, обнаруживаемой на дендритных клетках миелоидного происхождения (FITC, «BD Biosciences», США); CD 14 - маркера моноцитов (РЕ, «BD Biosciences», США); CD 209 (PerCp-Cy5.5, «BD Biosciences», США) - маркера дендритных клеток.При пробоподготовке моноциты после культивирования окрашивали флуорохром-конъюгированными моноклональными антителами. Из культуральных плашек клетки переносили в пробирки для проточной цитофлуориметрии (Falcon, «BD Biosciences», США). Пробы центрифугировали с ускорением IlOOg в течение 5 минут при 4°С. Далее клетки (0,5 млн клеток в 100 мкл буфера) инкубировали с флуорохром- конъюгированными моноклональными антителами к CDla, CD 14, CD209 из расчета 1,0 мкг/мл в течение 20 минут на холоде (4° С). По окончании инкубации промывали 2,0 мл буфера от несвязавшихся антител и центрифугировали с ускорением 490g в течение 5 минут при 4°С. После деконтации добавляли по 400 мкл буфера в каждую пробирку, перемешивали и анализировали на проточном цитофлуориметре в течение часа после окрашивания. Для анализа использовали не менее 10000 клеток каждого образца.
2.3.3
Еще по теме Анализ иммунофенотипа моноцитов человека методом проточной цитофлуориметрии:
- Анализ концентрации цитокинов в кондиционной среде аденозин- модифицированных моноцитов
- Анализ экспрессии мРНК генов цитокинов аденозин- модифицированными моноцитами
- Анализ экспрессии мРНК генов аденозиновых рецепторов аденозин- модифицированными моноцитами
- Методы дифференциации затрат.Анализ безубыточности производства.Методы анализа зависимости между доходами от продажи, издержками и прибылью.Факторный анализ безубыточности.
- Тексты для анализа: 1. Бытие человека и сущность человека
- 3.3.4. Анализ структуры педагогической рефлексии методами корреляционного и факторного анализа
- ЗЛ Иммунофенотипическая характеристика аденозин- модифицированных моноцитов
- Оценка цитокинового профиля моноцитов
- 5.2 Финансово-экономический анализ предприятия - как метод диагностики кризисных явлений в деятельности предприятия5.2.1 Правила проведения финансового анализа арбитражными управляющими
- Роль аденозиновых рецепторов моноцитов при воспалении
- Основные методы сбора социологической информации. .Содержание методов, их достоинства и недостатки.Достоверность эмпирических данных и факторы на нее влияющие.Выборочный метод сбора информации. Генеральная и выборочная совокупности. Понятие репрезентативности. Типы выборочных совокупностей.Этапы социологического анализа.
- К. Фляйшер Б. Бенсуссан. стратегический и конкурентный анализ методы и средства конкурентного анализа в бизнесе, 2005
- Графические методы технического анализа
- методы экономического анализа, документальной ревизии
- 2.2.6. Методы анализа протоколов распределения ключей
- 3.2 Метод анализа размерностей
- Методы стратегического и конкурентного анализ
- 2.5. Метод анализа продуктов деятельности
- 8.13 I Метод морфологического анализа
- методы анализа документов