Анализ концентрации цитокинов в кондиционной среде аденозин- модифицированных моноцитов
Для наиболее полной оценки влияния аналога аденозина NECA на цитокиновый профиль моноцитов необходимо анализировать не только уровень экспрессии мРНК генов цитокинов, но и также непосредственно уровень белкового продукта в кондиционной среде.
Поэтому методом иммуноферментного анализа были изучены концентрации следующих цитокинов в кондиционной среде стимулированных и нестимулированных аденозином моноцитов: IL-I (3, IL-6, IL-8, IL-10, IP-10, TGFp, PFGF, VEGF.В результате исследования было установлено повышение концентрации сосудисто-эндотелиального фактора роста в кондиционной среде стимулированных NECA моноцитов. Концентрация данного ростового фактора в кондиционной среде культур моноцитов при стимуляции 30 мкМ NECA в течение 24 часов повышалась в 23 раза, а при стимуляции 100 мкМ NECA в течение 72 часов - в 37,5 раза. Концентрация остальных цитокинов в кондиционной среде моноцитов оставалась неизменной вне зависимости от режима стимуляции. Присутствовала тенденция к повышению IL-IР, IL-10, снижению IP-10
Содержание исследуемых цитокинов при различных режимах культивирования в кондиционной среде культур моноцитов периферической крови представлено в таблице 3.
Таблица З
Концентрация цитокинов в кондиционной среде моноцитов периферической крови при различных режимах культивирования. Me (Q25-Q75), пг/мл
| Цитокины | Режим культивирования | |||
| DMSO, 24 ч | ЗОмкМ NECA, 24 ч | DMSO, 72 ч | IOOmkM NECA,72ч | |
| IL-IP | 2,77 (0,62-9,80) | 5,26 (1,29 -64,78) | 3,43 (0,06-45,64) | 4,80 (3,71-28,59) |
| IL-6 | 108,62 (65,14-262,71) | 149,20 (69,86-300,12) | 84,02 (50,76-366,30) | 85,43 (71,75-337,81) |
| IL-8 | 3268,25 (1991,12- 5106,34) | 3555,13 (2620,46- 4806,17) | 2431,32 (793,41- 4547,33) | 1949,15 (896,11- 4424,46) |
| IL-IO | 23,35 (18,85-34,38) | 29,01 (20,15-36,01) | 25,50 (20,40-31,82) | 31,11 (19,90-47,29) |
| IP-IO | 47,40 (44,39-50,37) | 44,39 (42,87-48,89) | 51,09 (44,77-59,59) | 47,87 (42,87-224,90) |
| TGFP | 40,06 (37,56-44,68) | 40,36 (37,80 -45,39) | 40,79 (39,06-42,77) | 40,95 (39,47-43,67) |
| PFGF | 240,92 (235,80- 256,31) | 246,83 (238,73- 264,81) | 250,40 (237,24- 258,66) | 243,12 (229,23- 263,72) |
| VEGF | 1,21 (0,03-2,95) | 27,94* (8,42-58,95) | 0,01 (0,07-0,36) | 37,54* (9,09-75,04) |
Примечание:
*- статистически значимые различия по сравнению с показателями клеток, культивируемых с DMSO (р