<<
>>

Оценка функции стволовых кроветворных клеток

Долгое время в качестве стволовых кроветворных клеток (СКК) рассматривали клетки, дающие колонии в селезенке облученных

мышей - КОЕс. Однако в последние годы такое предположение было экспериментально опровергнуто.

Примитивные СКК (П-СКК) в культуре созревают до стадии КОЕс за 4-6 нед. Несмотря на то что ни КОЕс и ни одна из категорий клеток, способных к колониеобразованию в культуре, не относятся к классу П-СКК [Чертков И.Л. и соавт., 1990], тем не менее, согласно теории клональной саксессии (последовательная смена кроветворных клонов в результате последовательного созревания одной за другой СКК) число КОЕс, мигрировавших из костного мозга (КМ) в селезенку, отражает функциональное состояние клона кроветворных клеток и, следовательно, функции СКК, продуцирующей этот клон. Кроме того, по числу КОЕс можно судить и о функции лимфоидных стволовых клеток, обеспечивающих иммунопоэз [Петров Р.В., Хаитов Р.М., 1981].

До последнего времени в литературе [Забродский П.Ф., 1998] описывают содержание КОЕ в селезенке после летального облучения мышей с экранированием Vi голени, как отражение функции стволовых кроветворных клеток (хотя с учетом вышеизложенного такое изложение требует определенных пояснений). Это, на наш взгляд, допустимо, исходя из гносеологических причин, не позволяющим исследователям в прикладных областях токсикологии, физиологии и т.п. достаточно быстро вникнуть в суть сложных концепций (гипотез) гемопоэза.

Влияние ксенобиотиков на функцию СКК [в более строгой формулировке по И.Л.Черткову (1990) - на функцию КОЕс] проводят путем определения миграции КОЕс из КМ в селезенку методом эндогенного колониеобразования после летального облучения мышей в дозе 8 Гр при экранировании костного мозга задней конечности до уровня 1/2 голени или методом экзогенного клонирования. Возможна оценка числа КОЕс после тотального облучения мышей в дозе 6 Гр. Через 8 сут селезенку извлекают, фиксируют ее в растворе Боуэна и макроскопически подсчитывают число колониеобразующих единиц (КОЕс) [Петров Р.В., Хаитов Р.М., 1972; Till J. Е., Me Culloch Е. А., 1961], используя лупу с увеличением в 2 или 4 раза. ТХВ вводят до облучения, практически одновременно с облучением или после него через 1-2 сут.

2.3.

<< | >>
Источник: Забродский П.Ф., Мандыч В.Г.. Иммунотоксикология ксенобиотиков: Монография. - СВИБХБ, 2007,- 420 с.. 2007

Еще по теме Оценка функции стволовых кроветворных клеток: